用几种方式在组织学实验室中使用水。不仅它是在实验室中制备的许多试剂的关键组分,而且还用于组织浮选浴,组织处理器和水浴。
然而,有时被视为理所当然的水纯度,其对实验结果的潜在影响忽视。
水污染物
自来水可含有几种除水分分子的化合物。
- 无机离子:氯化物、硝酸盐、硫酸盐、钠、钙、铁等。
- 有机分子:腐殖酸、酚类、单宁、农药残留等。
- 粒欧洲杯猜球平台子和胶体
- 微生物及其副产品
- 溶解气体
这些化合物可能会干扰最终载玻片质量,因为水是许多在组织学实验室制备的试剂的关键成分。
水净化
pH值和自来水成分可能会因地点和季节而有所不同。然而,必须获得可靠和可重复的结果。通过使用纯化水,不仅降低了污染物干扰最终载玻片质量的风险,而且也降低了实验可变性。
对水质的染色敏感性
通过去离子化方法通过离子交换树脂从水中除去离子。尽管该过程在去除带电分子时非常有效,但不除去中性有机分子。因此,去离子水可能不含离子,但可以含有一些有机污染物。
蒸馏
许多污染物是通过蒸馏除去的。锅炉中所含的水被加热,产生的蒸汽被冷凝,纯化后的水被收集在接收瓶中。这个过程可以重复(二次蒸馏)。在此过程中,预计最初存在的污染物(离子、有机物、颗粒和细菌)将不会蒸馏,而将停留在锅炉中。欧洲杯猜球平台图1显示了净化技术的原理图Elix紫外线净水系统.
图1所示。ELIX中包含的净化技术的示意图®紫外线净水系统
高级净水技术
蒸馏长期以来一直被认为是水净化的“黄金标准”,但今天新的净化技术已经证明了它们的功效和鲁棒性。
这些包括以下内容:
- 反渗透 - 一种基于膜的技术,除去大型污染物。
- 电脱硫 - 自再生过程,并由离子交换树脂,半透膜和电流组成。
- 254nm紫外光使细菌失活。
Elix®紫外线水净化系统结合这三种净化技术,通常用低水平的有机污染物(总有机碳,或TOC,<30ppb在线),低水平(电阻率>5mΩ-cm)和低水平的细菌水平。
实际插图
进行研究以评估用ELIX纯化的水的适用性®紫外线水净化系统在执行常用的染色程序时,并调查哪些常见的水污染物可能对这些程序有影响。
苏木精伊红(H&E)染色
所有病理组织样品的基本染色是H&E污渍。苏木精染色细胞核心;eosin染色细胞质,最结缔组织各种各样的红色,粉红色或橙色。
使用Leica Multistainer™工作站(Leica Microsystems, Bannockburn, IL)进行H&E染色。进行倒退染色。该染色程序使用自来水冲洗步骤之前和之后的苏木精,分化和蓝化步骤。
在本研究中,所有漂洗步骤,以及布鲁宁解决方案的制备(斯科特的自来水替代品,Surgipath Medical Industres,Richmond,IL)都是完全采用自来水或使用Elix纯化的水®5 UV系统(EMD Millipore Corporation,Billerica,MA)。
当用自来水代替Elix®纯化水,H&E染色的质量与自来水完成的染色的质量相当,如图2所示。使用净化水使污染物干扰风险与染色的风险相比,并提供一致性而不损害染色质量。
图2。扁桃体组织的显微照片用H&E染色。冲洗步骤和斯科特的自来水替代品准备用自来水(A)或Elix准备®纯净的水(b)。图片由E. Macrea和W. Lange提供。
Grocott的甲蛋白银(GMS)污渍
银污渍对水污染物高度敏感。GMS染色通常用于证明真菌,酵母和肺细胞的存在。大多数真菌相当大,并且他们的细胞壁富含多糖。GMS染色用铬酸将多糖氧化成甲醛,然后可以与银离子反应。
对于实验,肺组织的肺组织部分被安装在超级肺部(Pneumocystis jiroveci)®使用幻灯片(Erie Scientific Co.,Portsmouth,NH)和商业GMS套件(Grocott的真菌方法,Poly Scientific研发公司,湾岸,NY)。用ELIX制备甲磺胺硝酸酯的溶液®纯净水,蒸馏水,或去离子水。
用长生不老药净化的水®系统(c)得到满意的结果:P. Carinii的良好染色,没有背景染色,如图3所示。蒸馏水(D)减轻了生物体的染色,但没有贡献背景染色。去离子水(e)似乎加强了背景染色以及P. Carinii的染色。
另配以甲胺硝酸银溶液Elix®水以下污染物之一,以评估它们对染色的影响:硫酸氢钾(1mg / L或PPM),硫酸铜(1ppm),硫酸镍(1ppm),硫酸亚铁(1ppm),钠次氯酸盐(4ppm),三磷酸钠(100ppm),硅酸钠(10ppm),内毒素(1000 eu / ml),腐殖酸(1ppm)。
所有幻灯片的其余步骤都是一样的。所有载玻片一式两份,每一套载玻片使用相同批次的所有适用试剂进行评估。
图3。用Elix制备的亚甲胺硝酸银溶液染色GMS的显微照片®纯化水(C)、蒸馏水(D)或去离子水(E)。图片由E. Macrea和W. Lange提供。
与用Elix制备的溶液相比,所测试的所有金属硫酸盐都会降低P. Carnii染色的强度®纯净的水如图4所示。铜和铁也导致了弹性纤维的染色。
图4.用Elix制备的亚甲胺硝酸银溶液染色GMS的显微照片®纯净水和以下污染物之一:硫酸钾(F),硫酸铜(G),硫酸镍(H),硫酸亚铁(I),硫酸钠(镍钠(J),三磷酸钠(K),硅酸钠(L),内毒素(m),腐殖酸(n)。图片由E. Macrea和W. Lange提供。
结论
用反渗透的组合纯化的水,过滤和紫外线适用于各种组织学实验,从常用和稳健的程序(例如H&E染色),更精细,例如银染色。
它可以使用代替去离子或蒸馏水,并提供类似的结果,同时降低由于水污染物引起的干扰风险。由...生产的纯净的水Elix®系统可以在整个实验室中使用。
这些净水系统易于使用和维护,并且它们比传统的蒸馏设备消耗更少的能量和水。2020欧洲杯下注官网
使用水净化系统提供恒定可靠的水质,这在越来越多的组织学程序是自动化的,并且在组织学实验室中正在实施质量管理系统。
这些信息来源于EMD Millipore - Lab Water Business Unit提供的材料,并经过审核和改编。欧洲杯足球竞彩
有关此来源的更多信息,请访问EMD Millipore实验室水事业部.