使用EVOQ Elite LC-MS/MS系统对Carbendazim的定量多重反应监测

Carbendazim是一种广泛的杀菌剂，用于耕作作物的生产和储存。然而，它被认为是内分泌破坏者，并可能影响暴露或消费后的人类健康。此外，在过去的几十年中，这种农药的环境毒性有充分的环境毒性导致对Carbendazim的规定日益严格，最终在美国的一项禁令中结束了。

Carbendazim在进口水果产品中的残留存在可能会对公共卫生产生潜在的有害影响。发现2011年进口到美国的巴西橙汁含有卡宾达齐。在次年，发现进口的中国品牌葡萄酒含有大量浓缩的卡班齐齐。因此，FDA将进口中的Carbendazim含量限制在不超过10ppb。

液相色谱与三倍四极杆质谱法（LC-MS/MS）相结合，被广泛认为是农药筛查的行业标准分析方法。本文讨论了使用Bruker EVOQ LC-MS/MS系统在橙汁和葡萄酒矩阵中分析Carbendazim的定量MRM方法的开发，其校准范围从0.005ppb到50ppb。

EVOQ Elite LC-MS/MS系统

这EVOQ液相色谱三倍（LC-TQ）（图1）的目的是为了在最快的样本到报告时间内对许多真实样品进行可靠的量化。它提供了前所未有的灵敏度，线性，准确性，精度和广泛的动态范围，用于多个反应监测（MRM）测定。大气压力电离（API）技术和软件的进步使其成为常规高敏性，定量分析的革命性技术。

图1。EVOQ Elite LC-MS/MS系统。

由于可能的最低系统延迟体积，Advance LC泵技术在分析流速下提供了前所未有的弹道梯度可重复性。这种设计特征可减少梯度延迟并确定高度精确的保留时间，从而导致较短的运行周期时间，而对定量LC-MS/MS分析的重复性必不可少。

LC-TQ性能通过促进方法驱动的，在线清理或样品预浓缩来扩展。在同一模块中包含第三个泵可以节省基准空间并简化完整软件控制下的配置，同时提供快速方法开发的灵活性。以下是EVOQ Elite LC-MS/MS系统的关键好处：

• 由于新型交错四极杆（IQ）双离子漏斗，可以轻松获得对生物分子和微小分子的超高敏感性。
• 可靠地在强大的基于孔板的API接口上运行矩阵富含矩阵的样品。
• 可以通过创新的真空绝缘探针（VIP）加热电喷雾探针在高流速下有效地分析热不稳定分子。
• 基于异常的数据浏览软件可以通过方便地突出显示不满足预设方法标准的色谱图来节省时间。

样品制备和实验设置

用于分析果汁中农药的样品制备通常采用两种策略：固相提取（SPE）或“稀释和射击”，其中“稀释和射击”是合适的技术，由于其操作简单性。通常在分析前进行溶液的稀释，以减少由高浓度内源物质引起的基质效应。然而，很少进行分析以识别适当的稀释因素或评估稀释因素引起的矩阵干扰以进行卡宾齐姆分析。

Here, the samples analyzed included orange juice samples A and B, and wine samples of red wine A, white wine A, and red wine B. The samples were diluted with water for the ‘dilute-and-shoot’ analysis, using 5X, 20X, 100X, 200X, 500X and 1000X dilution factors, followed by spiking with 1ppb of carbendazim. In addition, nine carbendazim calibration standards were made at 0.005, 0.01, 0.05, 0.1, 5, 10 and 50ppb levels.

色谱法（Advance UHPLC）

• 列：YMC C18-HYDRO，50mm x 2mm x 3µm
• 注射体积5µL
• 流速：400µL/min
• 溶剂A：水 + 0.1％甲酸 + 10mm铵甲酸
• 溶剂B：MeOH， + 0.1％甲酸 + 10mm铵甲酸
• 梯度条件：

  0.0min	30％b
  0.2分钟	30％b
  2.0分钟	60％b
  2.1分钟	95％b
  3.1分钟	95％b
  3.2分钟	30％b
  5.2分钟	30％b

质谱法（EVOQ Elite）

• VIP加热的ESI - 正模式
• 喷射电压：4000V
• 雾化器气流：50个单位
• 加热探针气流：45个单位
• 加热探针温度：450°C
• 锥体气流：15个单位
• 锥温度：300°C

实验结果

在图2中划定了针对稀释橙汁和葡萄酒样品的稀释系数的基质效应的百分比，显示了基质效应的降低至20％的橙汁，其稀释量高于100倍。对于葡萄酒样品，至少需要200倍稀释才能将基质效应降低到小于20％。

图2。对稀释因子的基质效应％揭示了橙汁100倍的适当稀释因子和葡萄酒的200倍。

通过EVOQ敏感性和可重复性评估设置的Carbendazim定量限制为0.005ppb（图3）。10.01ppb carbendazim的10次重复注射中的RSD％为3.4％，显示出出色的灵敏度和鲁棒性EVOQ Elite LC-MS/MS系统（图4）。

图3。校准曲线从0.005 ppb到50 ppb。

图4。EVOQ灵敏度和可重复性评估。10个重复注射的3.4％的RSD％表明灵敏度和稳健性。

使用EVOQ ELITE LC-MS/MS系统在稀释的空白矩阵中分析Carbendazim的定量结果（表1）表明，所有样品均具有痕量的Carbendazim，但远低于FDA接受的10ppb水平。但是，发现200倍稀释红酒A的碳胞菌素浓度为3740ppb，比可接受的水平大于300倍（图5）。

图5。200倍稀释的红酒B葡萄酒和200倍稀释的红酒A红酒的叠加离子色谱图。

表格1。EVOQ LC-MS/MS在稀释的空白矩阵中的Carbendazim分析。

空白矩阵	稀释因子	测量浓度。（PPB）	计算浓度。（PPB）
橙汁a	100	0.012	1.2
橙汁b	100	N/A。	<0.5
白葡萄酒a	200	N/A。	<0.5
红酒a	200	0.007	1.4
红酒b	200	18.7	3740

结论

结果清楚地表明了EVOQ Elite三倍四极杆LC-MS/MS开发基于LC-MS/MS的MRM方法，适用于Carbendazim定量。

该信息已从布鲁克化学和应用市场提供的材料中采购，审查和调整。欧洲杯足球竞彩

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