磺酰胺药物具有高且宽的光谱活性，通常用于预防和治疗细菌生长。然而，蜂蜜样品通常含有这些药物的残留物并对全世界的消费者构成健康危害，因为它们往往会导致过敏的人类的过敏性和/或有毒反应，并且可以从蜂蜜中潜在地将耐药细菌转移到人体上。
由于磺酰胺胺类药物的有害影响，许多国家为这些抗生素设定了最低要求的性能限制（MRPLS）。为此，欧洲联盟已在蜂蜜中以10μg/ kg的水平建立了磺胺酰胺的MRPL。
可以使用许多方法来确定和量化这些磺胺酰胺。然而，复杂的基质造成较差的敏感性和选择性，并使所需的MRPLS难以通过这些方法确定。相反，LC-MS / MS的使用已经证明了优异的选择性和敏感性，以在复杂的食物基质中定量靶向的MRPL水平的磺酰胺。
本文介绍了一种简单，快速，敏感和有效的方法，用于同时测定磺酰嘧啶（SMM），磺酰甲蛋白（SDM），磺胺酰胺（SD），磺胺丁胺（SDN），磺胺甲嘧啶（SM2），磺胺嘧啶（ST），磺胺嘧啶（SM1）使用Bruker的先进UHPLC系统用EVO键合的蜂蜜中磺胺甲酚（SMZ）和磺胺甲氧基 - 吡啶汀（SMP）残留物。通过在0.1和1水平下掺入坯料蜂蜜基质，10ppb的磺酰胺，在三个不同的日子中分析了方法重复性。
实验框架
采购了Sigma-Aldrich的LC-MS / MS级甲腈（ACN），甲酸和水，包括所有九磺酰胺的研究，即SMM，SD，SDM，SM2，SDN，SM1，ST，SMP和SMZ。
对于试剂制剂，使用三重蒸馏水。然后，在甲醇中制备1mg / ml每种标准的储备溶液并储存在0℃以下。此后，通过使用稀释剂稀释单独的储备溶液（ACN：水（20:80）来制备包含在1000ng / ml浓度水平下的混合标准溶液。然后，将相应的混合标准溶液中的混合体积掺入空白蜂蜜基质中，以制备0.1ppb，0.25ppb，0.5ppb，1ppb，2.5ppb，5ppb和10ppb的校准溶液。
对于样品制备，将2.5g蜂蜜用2ml 1％甲酸在水中酸化，并涡旋2分钟。然后，将8mL的ACN加入到该混合物中，其进行10分钟的超声萃取。此后，将来自BR73763试剂盒的1gM粉末加入聚丙烯管中并摇动30秒。然后将该混合物涡旋为15分钟以获得完全溶解，然后在3000rpm下离心3分钟。
然后，将顶部4ml有机层转移到离心管中并在氮气下在45℃下蒸发至干。然后将提取物通过0.22μm尼龙过滤器过滤到HPLC小瓶中，然后注射。
结果
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图1。所有九磺酰胺的色谱图在蜂蜜LOQ浓度水平下研究，蜂蜜含量为0.1ppb，峰达到峰值（pp）。
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图2。在LOQ水平和蜂蜜基质坯料中覆盖所有九磺酰胺的色谱图。
图1说明了在蜂蜜中以0.1ppb的LOQ浓度水平检查的所有九磺酰胺的色谱图，其具有峰 - 峰值（pp）S / N比。此外，在0.1ppb下蜂蜜基质中所有九个磺酰胺的S / n比在图10中以上。在图2中，可以看出，坯料蜂蜜基质非常清洁并且不包括任何靶向磺酰胺。
在该实验中，已经遵循欧盟决定2002/657 / EC，其表示许多参数以验证靶向化合物的检测。用于LOQ水平浓度的所有九个磺酰胺获得的结果在令人满意的精度范围内。对于所有九个磺胺酰胺获得的0.1ng / g的LOQ比不同国家规定规定的MRL相当低得多。下表如下所示表明每个目标分析物获得的MRM转变。
表格1。获得的MRM过渡。
| 化合物 |
RT. |
父片 |
生产 |
碰撞能量（v） |
| Sulfadiazin. |
3.35 |
251.1 |
一种156. |
20. |
| 251.1 |
108. |
12. |
| 磺胺甲嘧啶 |
3.90 |
271.1. |
一种156. |
5.04 |
| 271.1. |
92.1. |
20. |
| 苏哌嗪. |
4.13 |
265.1. |
一种172. |
24. |
| 265.1. |
92.1. |
12. |
| 磺胺胺 |
4.83 |
279.1. |
一种156. |
22. |
| 279.1. |
124. |
16. |
| 磺胺甲嘧啶 |
4.85 |
279.1. |
一种186. |
16. |
| 279.1. |
124. |
26. |
| sulfathiazoie. |
5.00 |
256. |
一种156. |
26. |
| 256. |
92.1. |
12. |
| Sulfamethoxypraiadazin |
5.10 |
281.1. |
一种156. |
14. |
| 281.1. |
188. |
14. |
| 磺丁辛 |
6.02 |
311. |
一种156. |
16. |
| 311. |
108. |
28. |
| 磺胺嘧啶 |
7.16 |
311.1. |
一种156. |
18. |
| 311.1. |
108. |
28. |
一种MRM过渡用作量子离子
结论
Bruker的提前Uhplc结合了EVOQ ELITE三重QUAD LC-MS / MS系统显示复合蜂蜜基质中所有九磺酰胺的特殊检测限和重复性。预先UHPLC还能够降低总色谱运行时间，结果表明，根据欧盟的要求，可以采用该技术进行蜂蜜中的磺胺类药物。该技术的主要应用包括食物检测，毒理学测试，环境分析和药代动力学。
这些信息已采购，审查和调整Bruker - Chemical and Applied Markets提供的材料。欧洲杯足球竞彩
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