微非均质体系的局部黏度估算

使用称为分子转子的荧光分子是有益的，在测定微雌性系统中的局部纳米级粘度，因为它只是需要测量它们的荧光寿命。该测量可以使用显微镜系统以更简单的方式进行，因为如果进行了荧光各向异性测量，则不需要进行光博的校正。使用Horiba Scientific Deltamyc示出了使用分子转子来监测多糖膜的凝胶化。

结冷胶制备的多糖膜

多糖是生物学上重要的聚合物分子，其中单体的重复单元通过糖苷键连接。这些碳水化合物在植物和动物营养和结构中发挥着关键作用。Gellan Gum包含线性四糖重复单元，这种多糖已经发现了几种应用，从食品行业到药物递送和组织工程应用。在加热时，螺旋多糖骨架通过螺旋到线圈过渡，伴随着粘度的显着变化。

通过在33至34℃的33至34℃下冷却来产生溶胶至凝胶转变，这与生物学兴趣的接近。已经有许多报告研究其几种浓度的粘度行为，并在阳离子有助于交联戈兰带负电的多糖螺旋，形成螺旋螺旋聚集体。通常研究其粘度确定散装性质，但由于对其生物活性的兴趣日益增长，这导致了需要检查显微镜量表的变化。

分子转子

荧光的关键特征是荧光团对其微环境的敏感性。通常A.荧光各向异性可以考虑测量，其中监测旋转分子扩散，但有些荧光团进行粘度依赖的分子间重排，影响它们的荧光寿命。通过减少测量的数量，这使得衰减获取更快，在显微镜的情况下，避免了与照片漂白相关的问题。这种分子的一个实例利用了这项工作。

图1。斯蒂巴藤染料Daspmi

为了使用这种现象，通过在已知粘度的溶液中确定它们的荧光寿命来进行校准（这应该在寿命的终型VS粘度的对数图上产生线性校准）。在Horiba Scientific Deltapro上测量的荧光衰减的一个例子，以及在不同粘度下的Daspmi的平均寿命的曲线图如图2所示。

图2。绘制不同粘度的Daspmi的平均寿命

监测Gellan Gum的粘度

使用ΔYyc进行测量，如图3所示FLIM(荧光寿命成像)利用运行在25MHz的470nm发射DeltaDiode激光器。将含有结冷胶的染料滴置于显微镜载玻片上，并在环境条件下干燥。下面显示的是载玻片上凹孔中的干燥样品。

图3。DeltaMyc

经过干燥锋面的区域被选中进行成像，如图4所示。对应的FLIM测量如图5所示。

图4。横跨干燥前的区域

图5。相应的FLIM测量

这显示了平均寿命的减少，用彩虹刻度来说明，从干燥地区到湿润地区(从左到右，有示例横截面)。这对应于粘度的降低。使用寿命“校准”，可以估算出从湿区到干区粘度增加了约600倍。当结冷胶薄膜干燥时，也可以使用显微镜在单点上监测DASPMI的荧光寿命。

所得荧光衰减的实例如图6所示。

图6。荧光衰变的例子

这显示了在与仪器响应(IRF)(通过显微镜载玻片散射光获得)再卷积后，使用DAS6可以获得平均寿命的衰变。

结论

可以从对紧密型DeltaMyc进行的时间分辨测量中观察到，使用荧光寿命测量，可以在空间上监测与凝胶和干燥过程相关的粘度变化。本笔记显示的结果基于以下论文，G. Hungerford, M. Toury, D. McLoskey, N. Donaldson, A.S. Holmes-Smith, 2012。“在多糖膜内原位形成银纳米结构及其应用潜在的生物相容性荧光《软物质》，8,653 -659。

这些信息来源于HORIBA Scientific提供的资料。欧洲杯足球竞彩

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