NICOMP 380动态光散射(DLS)粒度分析仪与多角度测仪耦合的粒度分析仪可用于尺寸蛋白,通过热和冷技术,20,60和90度制备。与高增益雪崩的光电二极管检测器(APD)和高功率15MW激光二极管结合的这种能力可以提供与标准NICOMP 380相比增益增加12.低角度DLS可以产生关于蛋白质聚集的关键数据其他大分子由于较大的颗粒散射在向前方向上的相对较多的光照。欧洲杯猜球平台
DLS技术
DLS是一种标准的亚微米颗粒分级技术。欧洲杯猜球平台被分散粒子散射到某一特定方向的光强度有随时间周期性变化的趋势。欧洲杯猜球平台这些强度随时间的变化是由于布朗运动引起的粒子位置的连续变化。欧洲杯猜球平台
DLS器件从强度与时间剖面获得相关函数。研究了特征衰减时间的指数衰减相关函数,特征衰减时间由Stokes-Einstein方程与粒子半径相关,然后与扩散系数相关。与激光衍射相比,DLS技术有几个优点。DLS提供了一个绝对的测量,因为它不需要了解悬浮粒子的组成和光学特性。欧洲杯猜球平台
专利的Nicomp分析算法能够以相对较高的分辨率和精度测量倾斜单模态或接近双模态。DLS技术能够准确地测定小于50nm的颗粒大小,并能快速简便地确定小蛋白质分子的大小。欧洲杯猜球平台此外,多角度DLS还可用于获取蛋白质聚集的定量信息。
简要介绍Nicomp DLS系统
多角度nicomp380分析
本文利用配备APD和高功率15mW激光二极管的多角度Nicomp 380对热、冷两种方法制备的BSA进行了分析。图1显示了在与入射光束90°处获得的每个蛋白的强度加权psd。每个PSD包含两个峰:一个在50nm,另一个在8nm左右。
图1所示。DLS尺寸在90°处的蛋白质分布。一个寒冷的准备;b。热的准备。
第一个峰值代表天然蛋白质。平均直径与之前对同一蛋白质的测量结果一致。次级峰可能代表样品中存在的聚集物,但由于观察体积中只包含少量这些粒子,所以不明显。欧洲杯猜球平台
探测的角度Nicomp 380降低到相对入射光的20°,以增加从聚集粒子获得的信号强度。欧洲杯猜球平台通过这种方式,就有可能获得对合计的更精确的统计。图2显示了每种制剂在20°下获得的强度加权psd。在这里,得到的psd包含两个峰,在8nm处有一个天然峰,但有一个强而明确的聚集峰。
图2。20°时蛋白质的DLS大小分布。一个寒冷的准备;b。热的准备。
这些数据显示了Nicomp 380在90°和20°时表现出的出色的分辨率,以及仪器在每种情况下从聚集物中分离原生峰的能力。此外,在每个角度上固有峰的平均直径没有变化,说明了仪器的多角度能力。
图3显示了经过过滤后的温准备样品的20°DLS数据,分别通过两个不同的过滤器,一个过滤器过滤了100,000 MW单位的颗粒,另一个过滤器过滤了100万MW单位的颗粒。欧洲杯猜球平台在这里,聚合峰主导了每个过滤样本的psd。几个新的样本等价物证实了这些结果。
图3。过滤后,在20°温预下DLS。一个100 k MWU;1 Meg MWU。
图4显示了在20°下,将等量纯净水通过100 K过滤器所获得的测量结果。在20°处发现了大散射强度,研究在330nm处产生了一个峰值,这与从100 K过滤蛋白样品中获得的平均直径相似。
为了了解过滤器对结果的影响,试验了一份不过滤的水。图4也描绘了这些结果,在35nm处有一个峰值,在20°处观察到最大的散射强度。这背后的原因是纳米系统和其他过滤设备有曝气水的趋势。2020欧洲杯下注官网
图4。DLS在20°水中用于稀释蛋白质。一个过滤;b.过滤100K MWU。
图4a显示了大小为35nm的微气泡的存在。当水被过滤时,气泡聚集,如图4b所示。超声波是除氧的一种方法。温制样品通过100k滤光片后进行光声处理。结果如图5所示。虽然聚集峰仍然可以看到,但由于微泡数量的减少,现在可以观察到天然蛋白峰。这些结果与气泡理论一致。
图5。100K MWU过滤,超声处理后,20°热备蛋白DLS。
结论
结果清楚地展示了Nicomp 380的多角度能力,以及它如何可以应用于蛋白质和其他高分子应用。他们还展示了成本效益高的15mW/APD添加物的潜力。
这些信息已经从Entegris提供的材料中获得、审查和改编欧洲杯足球竞彩
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