磺胺类药物是一种合成抗菌药，由于其广谱和高光谱活性，通常用于治疗细菌生长。食品级蜂蜜加工过程中经常使用磺胺类药物，蜂蜜样品中也经常存在磺胺类药物残留，这可能对全球消费者构成重大风险。本文描述了使用Bruker EVOQ Elite三重四倍液相色谱质谱(LC-MS/MS)的一个案例研究，显示了在要求的最大残留限量(MRLs)下测定磺胺类药物的卓越灵敏度和选择性，并根据欧盟委员会决议规定的标准确证该技术。
磺胺类药物的风险
磺胺类药物可以抑制细菌产生叶酸，从而阻止细菌的生长和繁殖。
尽管事实上磺胺类药物对不同的细菌都有效，但它们的使用相当有限，因为众所周知，它们会导致过敏的人产生极端的过敏反应，并使人暴露在耐药细菌中。
磺胺类药物国际条例
由于磺胺接触可导致潜在风险的消费者，不同地区均设有自己的最大残留限量（MRL），最小性能水平（MRPL），和具体的检测标准来确定磺胺类药物。欧盟已经在10微克/公斤蜂蜜的水平建立了磺胺类药物的MRPL。它也对测试结果的解释，以保证通过认可的实验室官方残留监控所产生的分析结果的质量和可比性制定共同标准。
磺胺类药物检测
有许多方法可用于测定和定量食品级蜂蜜产品中的磺胺类。然而，在复杂的食物基质中，许多技术的灵敏度和选择性都很差，因此不能用来测定蜂蜜中磺胺类药物的含量。为此，液相色谱和质谱联用可以解决这一问题。
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图1所示。食品级蜂蜜中经常检测到磺胺类药物。
一个案例研究表明EVOQ精英LC-MS / MS可用于检测0.1ppb的磺胺水平，定量离子与合格离子的离子比恒定。该方法快速、简便，重复性好，线性良好，相对标准偏差<12%，回归(R) =0.996。EVOQ具有很高的特异性和敏感性，而且足够灵活，能够实现磺胺类药物检测和定量的高样品吞吐量。
EVOQ的高灵敏度反映在离子源几个硬件创新，例如抑制雾化气体的再循环，因此降低了化学噪声的主动排气。这也相当于减少停机时间，消除花费在清洗和运行的样品，从而在高通量实验室提供高的生产率和优异的灵敏度的时间。
此外，EVOQ的硬件还配有布鲁克的PACER软件，该软件可以提供基于异常的数据审查，大大降低定量分析的错误率。通过这种方式，PACER通过减少影响数据质量的扫描时间来提高效率，也加快了样品到报告的时间，这对实验室在常规定量工作中非常重要。
使用EVOQ质谱仪磺胺类药物的定量
所述EVOQ精英三重四极液相色谱质谱仪来测量在蜂蜜9种磺胺类，如表中所示如下：
表1。EVOQ测试九个常用磺胺类药物。
| Sulfadimethoxin(多发性骨髓瘤) |
| Sulfadiazin (SD) |
| Sulfadoxin (SDM) |
| 磺胺甲嘧啶(SM2) |
| 磺胺二甲嘧啶(SDN) |
| 磺胺甲基嘧啶(SM1) |
| Sulfathiozole (ST) |
| Sulfamethoxypyridazin（SMP） |
| Sulfamethizole (SMZ) |
对于样品制备，所有九个磺胺在1000纳克/毫升的浓度水平标准混合溶液稀释使用三重蒸馏水和乙腈分离磺酰胺储备溶液制备。然后，通过掺加在空白蜂蜜基质混合标准溶液的适当体积来制备校准溶液。是所使用的仪器的校准如下：
| 色谱参数(高级UHPLC) |
| 列 |
布鲁克强度C18 (50 mm x 2.1 mm x 3µm) |
| 列温度 |
环境 |
| 流速 |
0.3毫升/分钟 |
| 移动相 |
水与甲酸 |
| 流动相B |
乙腈与0.1%甲酸 |
| 注入量 |
10µL |
| 梯度条件 |
0.000分钟2％B
1.00分钟2％B
2.50 min 10%
3.50分钟10％B
4.00分钟20％B
B
7.00分钟95％B
8.50分钟95％B
2% B
10.00分钟2％B |
| 质谱仪参数(EVOQ Elite) |
| HESI |
+ 4500V |
| 探头温度 |
450°C. |
| 探测气体 |
45台 |
| 喷雾器气体 |
五十台 |
| 锥气体温度 |
350°C. |
| 锥气体 |
30个单位 |
| 主动排气 |
在 |
| 碰撞气体 |
arg |
| 冲撞气体压力 |
1.5mTorr |
结果与讨论
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图2。9种磺胺类化合物的色谱图均在蜂蜜中进行分析，定量限为0.1ppb，峰-峰信氮比。
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图3。所有九种磺胺类药物的定量限和空白蜂蜜基质的叠加色谱图。
图2显示了在0.1 ppb的蜂蜜中检测的所有9种磺胺类化合物的峰-峰信噪比(S/N)色谱图。结果表明，在0.1 ppb时，9种磺胺类药物在蜂蜜基质中的信氮比均远高于10。图3清楚地表明，空白蜂蜜基质中没有任何靶向磺胺类药物。
案例研究是根据欧盟第2002/657/EC号决议进行的，该决议规定了一些参数来确定目标化合物的检测。
该技术是可重复的具有低于12％的相对标准偏差，如表2所示。在0.1纳克/克定量限为所有九个磺胺实现将结果良好精度内的令人满意的范围。此外，毫微克/克获得的0.1的量化的限制下研究所有九个磺胺均大大低于规定的MRL由不同地区的法规。
表2。磺胺类药物在蜂蜜性能总结。
| 的名字 |
校准范围（ppb）的 |
R2 |
%RSD 0.1 ppb 10次/天重复 |
% RSD为1 ppb，每天重复10次 |
%RSD, 10 ppb, 10次/天重复 |
| Sulfadimethoxin(多发性骨髓瘤) |
0.1-10 |
0.999 |
11.53 |
7.30 |
8.94 |
| Sulfadiazin (SD) |
0.1-10 |
0.998 |
6.61 |
5．04 |
6.45 |
| Sulfadoxin (SDM) |
0.1-10 |
0.996 |
6.82 |
11.43 |
6.65 |
| 磺胺甲嘧啶(SM2) |
0.1-10 |
0.999 |
9.39 |
7.90 |
6.85 |
| 磺胺二甲嘧啶(SDN) |
0.1-10 |
0.999 |
3.93 |
7.18 |
6.77 |
| 磺胺甲基嘧啶(SM1) |
0.1-10 |
0.999 |
5.74 |
11.74 |
6.35 |
| Sulfathiozole (ST) |
0.1-10 |
0.999 |
6.84 |
6.68 |
5.62 |
| Sulfamethoxypyridazin（SMP） |
0.1-10 |
0.999 |
5.74 |
7.00 |
4.99. |
| Sulfamethizole (SMZ) |
0.1-10 |
0.999 |
7.84 |
6.88 |
7.81 |
结论
Bruker的EVOQ Elite液相色谱质谱仪为正在研究的所有9种磺胺类药物提供了良好的重复性和检测限。这与PACER软件相结合，可以在尽可能快的时间内提供一致的结果。Advance UHPLC的使用也显著减少了总色谱运行时间。因此，更快的样品到报告时间，增强的灵敏度和低维护的组合，使EVOQ适合在高通量实验室处理复杂的样品。
这些信息来源于布鲁克化学和应用市场公司提供的材料。欧洲杯足球竞彩
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