外泌体和微铅的介绍

为了确定液体悬浮液中样品的粒度分布，NTA利用布朗运动和光散射的性质。激光通过样品室和悬浮液中的悬浮液中的颗粒送出，使得它们可以通过具有相机的20倍放大显微镜容易地可视化。欧洲杯猜球平台相机以30 FPS运行，在大约100×80 x10μm的视野下捕获棕色运动下的颗粒的视频文件（图1）。欧洲杯猜球平台

图1。NTA中使用的光学配置的示意图。

逐帧捕获粒子运动。专有的NTA软件同时识别和追踪每个观察到的颗粒的中心，并确定X和Y平面中的每个粒子移动的平均距离。欧洲杯猜球平台该值允许确定粒子扩散系数（DT），如果样品温度T和溶剂粘度η是已知的，则球形等同的流体动力直径，D.，可以使用Stoke欧洲杯猜球平台s-Einstein方程（等式1）来识别颗粒的颗粒。

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*其中K._B.是boltzmann的常量。

图2。由NTA生成的大小分发配置文件的示例。发现该样品的模态大小为约70nm，还存在较大的尺寸粒子。欧洲杯猜球平台

定义和命名法

微胶囊和外泌体

由于微膜和外泌体存在于各种真核和原核生物中，并且在病理和生理过程中发挥重要作用，因此它们处于激烈的调查中。

基于Gyorgy（2011）所做的评论，外泌体可定义为50至100nm直径，直径100-1000nm直径和微泡，最常用的技术在纯化，分离，检测和分析中得到了最常见的（Gyorgy等，2011）。

有不同的定义。SIMPSON等人（2009）定义了通过大量细胞类型释放出40 -100nm直径膜囊泡，所述内吞原点释放到具有质膜的多猪体融合的细胞类型，主要是作为无细胞间通信的载体。

大多数常见的描述符是微粒，MV，外肌肉，外孢子，外侧囊泡，卵囊泡和囊囊体。欧洲杯猜球平台使用的其他名称包括Argosomes，Promininosomes，P4颗粒，前列腺和其他几种（Lee等，201欧洲杯猜球平台1）。

血小板衍生的微粒欧洲杯猜球平台

血小板衍生的微粒（PMP）可以定义为从血小板活欧洲杯猜球平台化的血浆膜产生的囊泡（<1μm）的异质群体通过许多刺激物。然而，外泌体源于细胞内多猪体。

PMP也与源自巨核细胞的微粒不同，即使微粒和PMP具有相同的表面标欧洲杯猜球平台志物。

可以说，微孔体的不同定义是微绒毛体或外泌虫或外泌体，是因为它们具有多种细胞来源，通过几种原因并提供各种功能，所有这些功能仍然需要澄清。

起源，发生和角色

微铅的起源

• 染色细胞分解为凋亡体
• 细胞血浆膜（异位体）的膨胀和
• 以外泌体形式的质膜材料的内骨加工和排放

参与致癌转化，微环境刺激，细胞活化，压力或死亡的途径可能引发他们的发电。血管素事件在血浆膜（外孢囊，血囊泡）或内体结构（外肌肉）（外来肌肉）（Gyorgy等，2011）中进行; Lee等，2011）。如Lee等人（2011）所证实的微胶体被认为被认为是细胞间通信的介质，因为它们可以合并，并将生物活性分子含量（货物）的曲目转移到受体细胞。

外来的主要特征

• 在羊水如羊水，尿液，滑液，恶性腹水，支气管，唾液血液，血浆，唾液和血液（Simpson等，2009）中，以及许多其他作用的体液中存在，因为它们具有不同的分子与其建筑有关的结构
• 源自母乳的外泌体对于发展婴儿的免疫系统至关重要（Admyre等，2007）
• 外泌体也在细胞信号传导中发挥重要作用，因此表现出与疾病进展的良好关系
• 外虫物的生理功能仍在辩论下

准备和检测协议开发

分离和制备微泡和外泌体的方法大大差异，并且这种差异可以对所获得的任何调查结果产生非常强烈的影响。研究人员比较了动态光散射（DLS）和NTA，并得出结论，DLS敏感性在多分散样品类型中较低，如细胞衍生的MP所示。NTA能够精确地在样品中施加颗粒。欧洲杯猜球平台

Ludwig和Giebel（2011）利用了NTA和EM来尺寸，富集的富核溶液，暗示它们大多含有80至160nm的颗粒，而在记录和用基于EM的技术进行记录并准备时相同的样品显得相当大。欧洲杯猜球平台

Huang等人（2012）比较超过滤，一种技术可以基于具有更传统的超离心方法的物理尺寸的特性迅速地分离外来体。证明该方法非常有效，因为粒度定义为30至150nm。

含有肌苷富含富含氧化丙氨酸富含的富含丙氨酸富含的C-激酶底物（Marcks）肽作为探针的额外研究（Morton等，2012）使用NTA。

隔离和纯化方法

由于细胞培养上清液和生物流体含有不同类型的脂质膜，因此进行高质量的外出纯化是重要的。通过Thery等人（2006）定义了外外纯化的几种技术，并讨论了评估纯化外出组制剂的纯度和均匀性的方法。

目前的隔离协议使用两步差分离心过程。由于外泌体具有低密度，因此当样品以高速（200,000×g）旋转时，它们预计才能保持低速（17,000×g）上清液并沉积物。

用于隔离和分析外泌体和微泡的技术已经是最近的专利活性的主题，其中NTA被用作分离株的外渗性质的证据（Vlassov等，2013; Antes和Kwei，2013; Jones和Knox，2013）。

为了确定具有尺寸排阻色谱（SEC）分馏的旋转过滤可能代表比传统的超速离心（UC），Nordin等（2013）的更可伸缩和可靠的技术，所述UC，旋滤和旋转过滤与顺序LC分馏进行分离来自细胞培养基的外泌体。Uaing RNA和蛋白质含量分析，蛋白质印迹（Wb），NTA和电子显微镜检查，显示通过简单的旋滤和顺序LC分级，可以从大型介质体积纯化高产外外源，但需要更多的发育它是外出纯化的金标准。

通过CHUTE等（2013）提出了一种涉及对规范热休克蛋白（HSP）作为用于捕获和富集细胞外微泡（EMV）的工具的新肽的方法。他们证明了EMV可以通过蛋白质含量纯化和评估，NTA与其他既定的EMV分离方法一样好。

最后，Stensballe等（2013）报道了使用外出微阵列富集的外索氏蛋白酶的蛋白质组学分析。

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