奶酪制作过程的副产品称为乳清，而当分离牛奶的成分时，形成的饮食补充剂和食物成分称为乳清蛋白分离株（WPI）。
WPI具有大量脂肪，胆固醇，乳糖和无碳水化合物的纯蛋白质。它的营养价值很高。WPI用于食品领域的许多产品：
WPI的四个主要组成部分是：
- β-乳球蛋白 - 主要在牛和绵羊以及除人类母乳外的许多其他哺乳动物中发现。它是一种含有162个氨基酸的小蛋白质，分子量为18.4 kDa。它主要作为二聚体存在。
- α-乳蛋白 - 大多数哺乳动物牛奶中发现的蛋白质，是乳糖产生所必需的。它的分子量为14,178KDA。
- 血清白蛋白 - 由肝脏产生，充当血液中脂肪酸，类固醇和甲状腺激素的载体蛋白。通过导致肿瘤压力，它可以平衡细胞外流体体积。这种球状水溶性蛋白的分子量为65 kDa。
- 免疫球蛋白 - 分子量为150 kDa，可用于中和外国物体。
在下文中，使用Viscotek Tdamax Malvern Alacytical分析了WPI样品。WPI的四个主要组成部分进行了分离和研究。
欧洲杯足球竞彩材料和方法
这Vescotek Tdamax系统由紫外线（UV），折射率（RI），内在粘度（IV），90°角光散射（RAL）和7°角光散射（LALS）探测器组成。将样品用两个viscotek p柱（300 x 7.8 mm ID），1 x P4000和1 x P3000进行，分别为700 kDa和1000 kDa。流动相为0.1 M pH 7.0磷酸盐缓冲液，注射了约500 µg的总材料进行单个测量。使用OmniSec软件，使用共轭分析研究了色谱图。
结果与讨论
组件表征
将保留量（RV）绘制在X轴和Y轴上，它是折射率（RI），紫外线（UV），直角光散射（RAL），低角度光散射（LALS），DP（Viscometer））， 分别。
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图1。组件表征。
表格1
|
免疫球蛋白 |
血清白蛋白 |
β-乳球蛋白 |
α-乳蛋白 |
| 峰值RV-（ML） |
17.057 |
18.174 |
19.238 |
20.349 |
| MN-（达尔顿） |
150,329 |
70,310 |
30,745 |
15,410 |
| MW-（达尔顿） |
151,366 |
70,469 |
31,847 |
15,549 |
| MZ-（达尔顿） |
152,485 |
70,635 |
33,125 |
15,697 |
| MP-（达尔顿） |
127,955 |
69,619 |
30,683 |
15,800 |
| MW / MN |
1.007 |
1.002 |
1.036 |
1.009 |
| IV-（DL/G） |
0.0596 |
0.0506 |
0.0339 |
0.0289 |
| RH（W） - （NM） |
5.181 |
3.833 |
2.564 |
1.921 |
| wt fr（峰） |
0.024 |
0.064 |
0.737 |
0.175 |
所有蛋白质的DN/DC固定为0.185。峰3时的分子量和重量分数分别为33 kDa和75％。这与β-乳球蛋白有关，从而表明它是WPI中的关键成分。β-乳球蛋白单体的分子量为18.4 kDa，但仍以活性状态二聚体的形式出现。因此，33 kDa峰被证明代表调光器。检测到α-乳蛋白/峰4的分子量为15kDa，因此与理论数据协调。
其中一个观察结果表明，A-乳蛋白蛋白的RI峰高小于β-乳球蛋白的一半，但UV信号的高度非常相同。因此，表明α-乳蛋白在280nm时具有比β-乳球蛋白更高的灭绝系数。
基于分子量，分别将70 K和150 K峰分别分配给血清白蛋白和免疫球蛋白。正如预测的那样，四个峰的PD值小于1.04，因为蛋白质通常具有狭窄的PD值。由于分离机制，流体动力半径值随保留量降低，并确定分子量较低的蛋白质的大小较小。
固有的粘度值也随着分子量减少。但是，这不是以线性方式发生的，从而显示出蛋白质结构的差异。β-乳糖球蛋白二聚体的固有粘度表现出来，该二聚体仅比α-乳蛋白单体的值高15％，尽管它是分子量的两倍。因此，这表明了以下事实：二聚体β-乳球蛋白的结构比α-乳阳性蛋白的结构更紧凑。
聚集检测
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图2。
LAL和RALS探测器在低保留量为10-12 mL的情况下显示单个峰，而RI或UV探测器没有任何峰。
RI和UV信号与浓度成正比，因此该峰的浓度恰好非常低。光散射与分子量成比例乘以浓度，因此分子量必须非常大，以便在光散射图中显示峰。总体的大小清楚地表明了它以低保留量洗脱的事实。
还检测到在粘仪检测器中未形成峰值。原因是这些聚集体非常紧凑，并且与纤维或其他结构不同，内在粘度低。
结论
从该单个实验中获得的数据表明，Viscotek Tdamax可以表征非常复杂的蛋白质混合物，例如WPI中发现的混合物，如果它们可以通过色谱法对它们进行良好的分离。可以根据其结构，浓度，分子量和流体动力学大小来研究所有四个WPI组件，并根据它们的结构，浓度，分子量和流体动力。某些蛋白质聚集体也可以通过光散射检测器来识别，即使它们的浓度非常低以实现完全表征。
因此，TDAMAX的能力使其适用于食品和营养应用，例如上述或其他与蛋白质相关的应用，例如生物药物研究。
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此信息已从Malvern Panalytical提供的材料中采购，审查和改编。欧洲杯足球竞彩
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