酿酒行业的酵母细胞枚举和尺寸

库尔特原理技术用于酿酒厂用于酵母细胞枚举和尺寸。Multisizer™3和Z™系列仪器模型基于此技术。本文强调了Z系列模型,包括Z2分析仪,Z1双阈值和Z1单个阈值。

Z系列模型在酵母细胞枚举和尺寸中的作用

在发酵过程中对酵母细胞进行分析,其中酵母菌菌株将麦芽汁中的碳水化合物转化为酒精和副产品,例如二氧化碳。发酵过程涉及几个阶段,在此过程中,对酵母细胞进行了分析。

投球过程是细胞枚举的关键步骤,通过将活酵母培养物引入冷却的麦芽汁中开始发酵过程。俯仰对于通过提供适当的细胞浓度来确保成功发酵至关重要。

啤酒的味道也将受酵母浓度的影响。音高浓度通常为30.3 x 106细胞/mL。可以在Z1单个或双阈值的帮助下确定初始酵母细胞浓度。需要Z2模型来测量尺寸分布。

当酵母细胞可能处于发芽阶段时,通常在发酵过程中进行采样。Z系列仪器将列举出一个单一单元。在发酵过程结束时收集的样品可能在随后的分析过程中显示出蛋白质材料的存在。建议对这些样品进行Z2分析仪进行分析。

尺寸分布直方图可能显示双模式的大小种群,显示酵母细胞群体和絮凝蛋白(图1)。在酵母样品中添加了一些量2M氢氧化钠(NaOH)以去除蛋白质材料,并在Z2模型上分析所得的样品。

具有双模式峰的酵母样品。第一个峰是酵母,而第二个峰是絮凝蛋白的峰。次级峰可以大于酵母细胞峰。

图1。具有双模式峰的酵母样品。第一个峰是酵母,而第二个峰是絮凝蛋白的峰。次级峰可以大于酵母细胞峰。图片来源:贝克曼·库尔特

仪器和实验程序

根据要求提供的仪器的选择包括ZL单阈值P/N 6605698,ZL双阈值P/N 6605699,Z2 Analyzer P/n 6605700或Accuvette™杯BCI P/N 8320592.此实验包括2M Naoh的试验Sigma,Z Pak,L3珠,L5珠,L10珠,P/N S8263,BCI P/N 8320312,BCI P/N 6602793,BCI P/N 6602794和BCI P/N 66602796。

对于Z1双阈值和Z2分析仪,将约10 µL的酵母样品添加到20毫升ISOTON II中。实验设置涉及100 µm的孔径管​​,设置为3 µm,阈值较低,上阈值10μm。计数模式设置在TL和TU之间,稀释系数为2000。

对于Z1单个阈值,通过将10 µL的酵母样品添加到20 mL Isoton II来制备样品。使用100μm的孔管,阈值较低为3µm。计数模式设置在TL上方,稀释系数为2000。

下一步是Z系统的校准,其中涉及将五滴L10珠添加到20毫升ISOTON II中,然后轻轻搅拌反转以避免引入气泡。然后,按下键盘上的“ CAL”按钮进入C1页面。将单元设置为微米后,以校准大小输入数字模式,并按下“开始”按钮以记录校准因子。重复三次相同的步骤以获取平均结果,然后以新的校准因子输入。

对于跑步尺寸标准,选择“设置”以将较低阈值设置为3 µm,上阈值为10µm。计数模式设置在TL和TU之间。现在,将五滴L5珠添加到Isoton II中,并通过反转轻轻混合。然后按“开始”按钮开始运行。然后在运行后通过Accucomp软件获取所得数据(图2)。如果有样本控件,则需要此时运行。

L3和L5珠用于设置大小参数。

图2。L3和L5珠用于设置大小参数。图片来源:贝克曼·库尔特

样品是运行的,选择了输出,稀释系数设置为2000。稀释因子值可能随样品密度而不同。结果类型设置为浓度,并将大约10 µL样品添加到20 mL isoton II并轻轻混合。现在,按下“开始”按钮开始运行。运行后的结果是用Accucomp™软件获得的(图3)。

酿酒酵母在37ºC生长2小时在蒸馏水中生长。平均酵母细胞大小为3.5µm。聚集体显示为7µm或更高。

图3。酿酒酵母在37ºC生长2小时在蒸馏水中生长。平均酵母细胞大小为3.5µm。聚集体显示为7µm或更高。图片来源:贝克曼·库尔特

对于具有双模式峰的样品,如图1所示,将四滴2M NaOH添加到样品中并轻轻混合。下一步是将最终溶液孵育五分钟。然后,按下“开始”按钮开始运行。ACCUCOMP™软件用于运行后获取数据。

结论

结果清楚地表明,在酿造行业使用Z系列模型进行酵母细胞枚举和尺寸。

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该信息已从贝克曼·库尔特(Beckman Coulter,Inc。)提供的材料中采购,审查和调整 - 粒子表征。欧洲杯足球竞彩

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