在购买新系统时,应考虑等温滴定量热计(ITC)仪器的特性、物理成分和技术规格。然而,拥有最佳组件和技术规格的系统不一定是用户友好的。用户必须根据他们的应用需求选择合适的仪器。本文讨论了在购买ITC时需要考虑的一些关键因素。
样本消耗
一个好的ITC结合曲线由一组注射热组成,精确测量注射峰面积的能力直接影响参数的值,如Kd(图1),特别是在低样品浓度(图2)。
图1所示。ITC注射峰的比较。
图2。ITC等温线的好坏。当峰面积能够准确测量时,实验数据点更有可能与拟合的束缚等温线很好地拟合。
尽管大多数供应商提供的基线变动性似乎是“OK”的,但原始数据往往在分析过程之前被操纵(图3)。这是一个耗时的过程,增加了KD数据和其他参数的不确定性。
图3。短期噪声和漂移的例子。左侧图中的绿线显示了两个短期噪声的示例。具有较高噪声的更高数据集。但是,对于测量典型ITC数据的峰面积无论是OK。
在低浓度下进行测量是良好的,以测试峰面积测量的准确性。可以通过比较从重复实验产生的亲和力和其他热力学参数的比较来评估该方法的鲁棒性。
可重复性
即使在较高浓度下也受重现的再现结果受到许多因素的影响,包括清洁注射器。建议使用热量表,使能易于清洁注射器和随后的干燥。注射重复性是另一个因素。优选的量热计必须具有能够提供具有高可重复性的非常低的体积的精密移液管。
仪器和软件的用户友好性
有必要评估硬件和软件是否易于使用。注射器装载和干燥必须快速简单。细胞端口的可见性是在不引入气泡的情况下向量油电池加载到量油的另一个关键因素。用户必须自己对仪器进行数据分析,以便评估软件。
响应时间
ITC仪器的响应时间直接影响样本消耗和分析时间。比较每个仪器运行和设置实验所需的时间有助于了解哪个仪器具有更快的响应时间。具有快速响应时间的ITC仪器可以在大多数情况下在样品消耗低的一天中执行更多实验。将仪器升级到自动平台将有助于处理巨大的量热数据。
能够测量广泛的亲和力
需要低样品浓度来测量ITC上紧密相互作用的亲和力,这应该能够准确地量化小的热量。应考虑响应时间和基线可变性等因素,以便仪器执行该测量的能力。结合过程的固有热是需要考虑的另一个因素。
为了评估ITC仪器在紧密相互作用测量中的性能,必须使用低浓度的样品,并且需要检查重复实验中亲和力的可变性。高浓度的样品需要用来测量弱相互作用。对于此类测量,建议使用易于加载的ITC仪器进行可重复测量,从而减少加载误差。
能够处理多个应用程序
用户必须检查ITC仪器是否能够处理其特定应用程序。金的热性能使其成为热测量的理想选择。蛋白质和二硫化物之间的相互作用可以用热量计测量,热量计具有与硫醇基团的反应而言是惰性的。
仪器的可靠性
在样本有限的情况下,有必要使用ITC仪器来产生可靠的结果。用户可以通过研究文献和观察高影响群体正在使用的ITC工具的类型来找到合适的工具。
制造商或供应商的声誉
评估ITC仪器的制造商或供应商的声誉也很重要。用户必须搜索在ITC仪器的开发和优化方面有良好记录的制造商。这些制造商不仅使系统的仪器之间的变化很小,而且还推进了技术和应用。他们有制造创新仪器的经验和资源,并为他们提供持续的支持。
售后服务和支持
建议从有能力提供售后支持的公司购买仪器,通过电话和电子邮件,专家级别的支持,现场基地服务,和持续的培训机会。因此,用户在购买ITC仪器之前,必须了解该公司提供了哪些支持。
价格因素
设计、性能和质量因仪器而异。虽然不同的国际贸易中心文书的规格在纸上看起来是一样的,但它们在实际性能、寿命和质量上有显著差异。最便宜的工具往往没有最好的长期价值,从长远来看会产生更多的成本。重复性差的慢速仪器会消耗更多的样品,花费更多的时间来产生结果,从而增加成本。
这些信息已经从Malvern Panalytical提供的材料中获得,审查和改编。欧洲杯足球竞彩
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