Louis Pasteur在1861年发现,葡聚糖是一种可溶于水性介质的多糖,并且具有最小的副作用,使其在医学领域和其他应用领域中广泛使用。
右旋糖酐的一些药用用途包括滴眼液润滑剂、降低血液粘度以防止血液凝结的抗凝血剂和静脉内营养液成分。
在这些应用中,每个葡聚糖样品的行为受其分子量的影响。例如,从血液中除去60kDa以上的分子量的去除样品并不容易,因此表现出比较低分子量型更长的时间较长的血液稀释效果。
葡聚糖-40具有40kDa的分子量,是抗凝治疗最广泛使用的葡聚糖。
急性肾功能衰竭是葡聚糖的罕见但可能的负副作用,由葡聚糖的结构和特性粘度引起。因此,葡聚糖样品的准确分析和分子量表征是必需的。
用GPC / SEC系统表征
许多不同大分子的表征,从天然蛋白质和聚合物到批量合成聚合物,通常通过凝胶渗透色谱(GPC)或尺寸排阻色谱(SEC)进行。
GPC / SEC系统的完整设置如图1所示。使用该系统,可以表征其分子量分布,分子量时刻,流体动力学尺寸和特性粘度。
图1所示。Malvern Panalytical的OmniSec三重检测GPC / SEC系统
在一个GPC /秒系统,液体流动相通过由多孔凝胶颗粒组成的分析柱转移溶剂化样品,其中大分子组分通过扩散控制分离,并且最终通过不同的检测器作为每个样品洗脱的样品进行研究。欧洲杯猜球平台
粘度计加折射率和光散射探测器通常存在于高级检测GPC /秒设置中。
实验程序和结果
在该实验中分析了来自1至650kDa的不同分子量的一系列葡聚糖样品。然后将样品与其他多糖,阿拉伯语和果胶进行结构。
在0.05M na的含水流动阶段,开始制备10个葡聚糖样品的GPC /秒分析2所以4.两列A6000M柱用于以1mL / min的流速进行样品分析。
所有10个葡聚糖样品的折射率图谱和LogMW图如图2所示,说明了随着LogMW图的不断下降,分子质量的范围从1kDa到超过1000kda。
图2。折射率色谱图的叠加和葡聚糖样品的logmw图
图3显示了样品DEX7的色谱图,通过在蓝色的折射率检测器信号中显示粘度计信号,在黑色的折射率检测器信号,黑色的低角度光散射信号和直角光散射(RALS)以绿色的信号。
样品的分子量分布可以通过显示每个保留体积下的计算分子量来可视化。
图3。样品DEX7的三倍检测器色谱图;logmw显示为金线。
为葡聚糖样品收集的分子数据,包括分子量时刻(mn,M.w和mz),流体动力半径(rh)、特性粘度([η])的变化趋势见表1。
在整个系列中,每个葡聚糖样品的固有粘度,分子量和分子大小的增量。
表格1。右旋糖酐样本的分子数据。
样本ID. |
米n(Da) |
米w(Da) |
米z(Da) |
PDI. |
[η](dl / g) |
Rh(纳米) |
DN / DC. |
DEX1. |
1,109 |
1278年 |
1,486 |
1.152 |
0.0368 |
0.895 |
0.15 |
DEX2. |
4,312 |
5,553 |
7,319 |
1.288 |
0.0705 |
1.797 |
0.15 |
DEX3. |
9677年 |
12,220 |
17,820 |
1.263 |
0.1048 |
2.664 |
0.15 |
DEX4. |
21,200 |
24,190 |
27800年 |
1.141 |
0.1543 |
3.852 |
0.15 |
DEX5. |
42480年 |
49520年 |
58,750. |
1.166 |
0.2213 |
5.503 |
0.15 |
DEX6. |
70,700. |
84530年 |
104400年 |
1.196 |
0.2840 |
7.127 |
0.15 |
DEX7. |
125,400. |
153,000. |
207800年 |
1.220 |
0.3790 |
9.527 |
0.15 |
DEX8. |
206200年 |
269000年 |
425,000 |
1.305. |
0.4633 |
12.18 |
0.15 |
DEX9. |
292100年 |
412000年 |
614,300 |
1.411 |
0.5045 |
14.36 |
0.15 |
DEX10 |
456,500. |
658500年 |
1087000年 |
1.443 |
0.6045. |
17.74 |
0.15 |
观察图4中的Mark-houwink图是观察这些趋势的另一种方法,显示每个m的样本的[η]w在整个分子量分布上。
在Mark-Houwink情节上,用不同的样品分子量但具有类似的结构,必须在同一条线上。由于葡聚糖样品的标记-HOUWINK图的重叠,因此在1,000da至超过1,000千千下方的线路形成为1,000da至超过1,000,000da。
图4。右旋糖酐系列(中心聚集线)、阿拉伯胶(底部)和果胶(顶部)样品的Mark-Houwink覆盖图
相反,在Mark-Houwink图上,不同分子结构的样品根据分子密度的不同出现在不同的点上。越致密的样本表现出较低的特性粘度,因此更接近于图的底部,而越致密的样本表现出较高的特性粘度(如出现在图的顶部的有问题的右旋糖酐导致急性肾功能衰竭)。
通过对阿拉伯胶样品和果胶样品的分析,描述了这一概念。作为一种天然胶质物质,阿拉伯胶样品比右旋糖酐致密,因此在Mark-Houwink图中出现在右旋糖酐系列之下(图4)。
果胶是一种常用的胶凝剂,出现在Mark-Houwink图上的葡聚糖系列上方(图4)。这些结果表明,胶凝胶的粘度高于胶凝剂的预期,尽管两个样品的分子量是相同的。
结论
从1kDA的不同分子量的分析结果的分析结果高达650kDa显示出前所未有的分子表征数据可以通过Malvern Panalytical的OmniSec三重检测GPC / SEC系统获得。使用样品的Mark-Houwink图表明了结构一致性。
对阿拉伯胶和果胶样品进行比较分析,说明了样品之间可见的结构差异。这些测量提供了对定义这些不可或缺的材料的行为的分子特征的更深入的了解。欧洲杯足球竞彩
这些结果还允许精确控制关键参数,包括分子量和结构,以及更好地靶向葡聚糖产品和级别到特定应用。
该信息的来源、审查和改编来自Malvern Panalytical提供的材料。欧洲杯足球竞彩
有关此来源的更多信息,请访问马尔弗恩帕尼特.