使用峰值回收以增加有效的色谱柱长度

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用户可以通过峰值回收率实现更有效的净化，降低成本。本文介绍峰值回收是可行的，此过程需要哪种技术规范。

简单地说，峰式回收利用柱床的长度多次延长了柱的分离长度。许多制备色谱的使用者都知道这个术语，但他们并不确切地知道这种特殊的溶液在哪里会有用。

在峰值回收时，峰值在洗脱后将峰值返回到柱上，使得延伸在一起的临界峰对与每个循环进一步分开。由于在多重重复循环期间洗脱液组合物必须保持恒定，因此峰值再循环需要等离子分离方法。

一种制备型HPLC系统由检测器、制备柱、制备泵、分馏阀和注射系统组成。

用于制备应用的色谱柱通常非常昂贵。因此，用户努力在实现的分离效率和产生的成本之间找到最佳折衷。因此，各个分离挑战和净化要求都设定了条件。这就是为什么复合分离挑战可能导致成本无效的解决方案和高费用。

特别是在有效净化所需的小粒度或特殊阶段的情况下，系统要求和制备柱的成本都成为限制因素。峰值回收提供了一种简单的解决方案，可以提高分离性能而不需要更大的投资。

技术要求

通常，术语“回收”和“回收模式”用于代表不同类型的回收：

1.基于时间的峰值回收

这不是自动模式，并与任何色谱软件一起使用。但是，配置更难以配置。在单个分离中的保留时间变化可以产生所收集的级分的纯度的变化。

2.自动峰值回收：

利用这种模式，软件可以通过峰值高度和/或坡度来控制回收。自动化模式(例如OpenLAB CDS EZChrom Edition)需要特定的软件包来提供高水平的安全性和舒适性。

3.溶剂回收：

软件包，如Pureitychrom或ClarityChrom Prep，提供溶剂回收作为节省溶剂的额外选择。如果没有峰的色谱区域中存在的溶剂被认为是清洁的，则可以根据时间或检测器信号再循环回到洗脱液中。此模式可以显着降低系统的运营成本。

只需使用T型和多位置阀即可使用回收模式。

t形接头通过一个端口(在许多情况下，阀门的第二个最后端口)将多位置阀门连接到系统泵供应。当系统从正常模式切换到回收模式时，阀门就切换到那个特定的端口。然后，泵不是从原液中抽出洗脱液，而是通过整个系统循环溶剂，如图1所示。

图1。具有多位置阀的制备型HPLC系统，使峰值回收。

将样品循环泵送，直到阀门切换到废物或分馏位置。

应用示例

两个(+/-)-α-生育酚异构体的分离是利用峰循环优化分离方法的一个实例。

与分析HPLC相比，优化的可能性更有限，适用于制备型HPLC。对于在反相模式下的制备应用，柱材料的选择主要限于标准相，最小粒径为10μm。另一方面，与内径为20至100mm的这些制备柱显示出较低的分离性能，但与具有小颗粒尺寸的类似柱相比，它们以高流速产生更低的背压。

处理复杂的分离任务的用户，如Tocophherol，其中目标物质狭义对污染物较狭义，将有有限的选择（图2）。所需的高性能泵，以及特定阶段的成本，导致更好地分离，通常超过益处。然而，不需要通常受损分离性能的折衷。如果使用了正确的技术，用户也可以实现优异的分离结果，即使具有廉价的大颗粒材料。欧洲杯足球竞彩

维生素E和生育酚

维生素E由许多脂溶性物质组成。它还含有八个生育酚的变体，其中仅α-生育酚是活性形式的。在食品工业中，只有生物活跃的形式是相关的。

α-生育酚主要用作食品工业中的E307，并作为化妆品的成分。立体异构体需要彼此进行色谱分离，以便测定它们的活动。

通常，用户必须支付更高纯度的产量，反之亦然，用于在标准条件下纯化（+/-）-α-生育酚。然而，通过在三个重复循环之后通过峰值回收来通过分离长度的伸长来实现基线分离（图2，黑色）。因此，可以在不影响纯度或产率的情况下进行分馏。

图2。峰值回收利用的帮助下，（+/-）-α-生育酚的分离（+/-）-α-生育酚（+/-）-α-生育酚（黑色）的分离。

结论

通过峰回收，可以增强α-生育酚异构体的分离，如图2所示，黑色。纯度和产量均类似于与更昂贵的柱材料的分离（图2，红色）。

一个标准的HPLC.系统可以很容易地改变实现峰值回收的实现。Knauer HPLC系统拥有一个模块化的体系结构，使它们适合于这些技术的实现和优化。不同的组件，如用于循环和分馏模式之间切换的多位置阀，可以很容易地纳入系统。

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