使用紫外显微镜识别和定位生长中的蛋白质晶体

由CRAIC技术2017年4月20日

摘要紫外-可见微光谱技术是分析微蛋白晶体的重要工具，目前已广泛应用于药物设计研究、结构生物学、药物生物分离(如胰岛素和药物控制给药系统)等领域。

紫外可见显微镜

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蒸汽扩散过程，如悬挂或坐滴法，被用来生长大多数蛋白质晶体。然而，盐晶体也经常在这些晶体旁边发现。正常的成像方法很难区分这两种晶体，但蛋白质很容易吸收280 nm的光，并在近紫外光下发出荧光。

虽然蛋白质可以通过成像固有的蛋白质荧光来与盐晶体区分，但这个过程非常缓慢，除了容易受到污染之外，提供的信息非常少。例如，即使是生长晶体的孔板也会发出荧光。另一方面，紫外显微光谱学快速、可靠，能提供更多有关晶体的信息，如晶体中的蛋白质浓度。

紫外显微分光光度计

CRAIC Technologies™公司开发了紫外显微分光光度计，如20/20 PV™，可以通过吸光度和荧光显微光谱快速区分蛋白质和盐晶体。

除此之外，当晶体被识别和定位后，紫外显微分光光度计也可以进行鉴定。测试过程是简单的，其中一个微观晶体的光谱是获得。在280nm处，蛋白质晶体强烈吸收光线。如果晶体是盐，它不吸收280纳米的光。此外，使用光谱可以确定晶体中的蛋白质浓度以及晶体的潜在污染。

一个例子的紫外-可见吸收光谱的单个微观蛋白质晶体如下所示。所有的测量都是使用aUV-visible-NIR范围显微分光光度计从CRAIC™技术。用紫外透明悬挂滴孔板生长晶体，并在晶体仍在板内时进行光谱采集。为了显示蛋白质晶体和盐晶体在280 nm处的明显差异，还捕获了蛋白质晶体的图像。

单蛋白晶体的吸收光谱

图1所示。单蛋白晶体的吸收光谱，从中可以测定晶体中蛋白质的浓度。单峰表明是纯蛋白晶体。

蛋白质晶体的紫外显微镜图像。

图2。蛋白质晶体的紫外显微镜图像。盐晶体是透明的。

这些信息已从CRAIC技术公司提供的材料中获取、审查和改编。欧洲杯足球竞彩

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美国心理学协会
CRAIC技术。(2020年10月23日)。使用紫外显微镜识别和定位生长中的蛋白质晶体。AZoM。于2021年9月2日从//www.wireless-io.com/article.aspx?ArticleID=13835检索。
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CRAIC技术。“使用紫外线显微镜识别和定位生长中的蛋白质晶体”。AZoM．2021年9月02。< //www.wireless-io.com/article.aspx?ArticleID=13835 >。
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CRAIC技术。“使用紫外线显微镜识别和定位生长中的蛋白质晶体”。AZoM。//www.wireless-io.com/article.aspx?ArticleID=13835。(2021年9月2日生效)。
哈佛大学
CRAIC技术。2020。使用紫外显微镜识别和定位生长中的蛋白质晶体．viewed September 21, //www.wireless-io.com/article.aspx?ArticleID=13835。