用Nicomp计算分子量

Nicomp可用于估算悬浮在溶液中的颗粒或大分子的平均分子量(Mw)。强调“估算”一词是因为使用动态光散射(DLS)技术测量分子量不如测定粒径准确,所有欧洲杯猜球平台基于DLS的仪器主要是为测定粒径而设计的。

介绍

在一个单位内测量的生命量基于DLS的仪器指颗粒扩散率或扩散系数D。有一个简单的经验公式可用于将悬浮颗粒(或大分子)的分子量Mw与其扩散率D联系起来:

D=αMw (1)

前因子常数α与周围溶剂和扩散颗粒的特定成分有关。预因子取决于温度T和溶剂粘度η,以及颗粒的质量密度。指数中的常数β与粒子和大分子的构型/形状有关(也可能是粒子和溶剂组成的函数,如聚合物)。指数β依赖于分子量和流体动力学半径之间的关系;对于简欧洲杯猜球平台单球体,β等于1/3。

从方程(1)中,分子量Mw作为扩散率D函数的简单通用表达式如方程(2)所示:

Mw=(α/D)1/β (2)

在Nicomp(图1)中,使用简单高斯分析获得的平均扩散率D(强度加权)从方程(2)计算Mw。在图2所示的控制菜单中输入α和β的值。

Nicomp-DLS系统

图1。Nicomp DLS系统。

Nicomp控制菜单。

图2。Nicomp控制菜单。

为了获得粒子平均分子量的可靠估计,必须提供常数α和β的可靠估计。表1列出了一些具有代表性的聚合物/溶剂系统的值。欧洲杯猜球平台

表1。粒子/溶剂系统的α和β。

聚合物 溶剂 温度(°C) α β
聚丙烯酰胺 20 8.46 x 10-4 0.69
聚丙烯腈 DMF 25 3.2 x 10-4 0.63
聚丙烯腈 DMF 35 2.19 x 10-4 0.58
聚醋酸乙烯酯 MEK 20 7.8 x 10-4 0.63
聚苯乙烯 MEK 25 3.1 x 10-4 0.53
聚异戊二烯氯仿 MEK 20 3.5 x 10-4 0.42
聚甲基丙烯酸甲酯 乙酸乙酯 20 1.61 x 10-4 0.48
聚乙烯醇 20 5.5 x 10-10 0.68

样本结果

免疫球蛋白G(IgG)冻干粉末(Athens Research)以1%的重量百分比溶解在PBS缓冲液中,然后稀释至10 mg/mL。使用图3所示的条件进行粒径和分子量估计分析。

自动打印/保存菜单。

图3。自动打印/保存菜单。

对样品进行了七次检查,控制菜单设置和显示Mw和粒度结果的最终结果如图4所示。

IgG的大小和Mw结果。

图4。IgG的大小和Mw结果。

IgG的预期Mw值为145 kDa或1.45e5(道尔顿),单位如图4所示。该值略高于参考值,可能是由于聚合和/或非专家样品制备。

结论

这个Nicomp-DLS系统主要被认为是粒度和zeta电位分析仪。为了确定蛋白质和聚合物的分子量,可以使用改进的和更优选的技术,但是可以使用本文描述的方法计算估计值。

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    恩特格里斯。(2020年6月17日)。用Nicomp计算分子量。亚速姆。于2021年11月11日从//www.wireless-io.com/article.aspx?ArticleID=14620.

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    恩特格里斯。2020用Nicomp计算分子量. 亚速姆,2021年11月11日查看,//www.wireless-io.com/article.aspx?ArticleID=14620.

评论

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    您在本研究中使用了哪种型号的NIcomp?

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