Nicomp可用于估算悬浮在溶液中的颗粒或大分子的平均分子量(Mw)。强调“估算”一词是因为使用动态光散射(DLS)技术测量分子量不如测定粒径准确,所有欧洲杯猜球平台基于DLS的仪器主要是为测定粒径而设计的。
介绍
在一个单位内测量的生命量基于DLS的仪器指颗粒扩散率或扩散系数D。有一个简单的经验公式可用于将悬浮颗粒(或大分子)的分子量Mw与其扩散率D联系起来:
前因子常数α与周围溶剂和扩散颗粒的特定成分有关。预因子取决于温度T和溶剂粘度η,以及颗粒的质量密度。指数中的常数β与粒子和大分子的构型/形状有关(也可能是粒子和溶剂组成的函数,如聚合物)。指数β依赖于分子量和流体动力学半径之间的关系;对于简欧洲杯猜球平台单球体,β等于1/3。
从方程(1)中,分子量Mw作为扩散率D函数的简单通用表达式如方程(2)所示:
在Nicomp(图1)中,使用简单高斯分析获得的平均扩散率D(强度加权)从方程(2)计算Mw。在图2所示的控制菜单中输入α和β的值。
图1。Nicomp DLS系统。
图2。Nicomp控制菜单。
为了获得粒子平均分子量的可靠估计,必须提供常数α和β的可靠估计。表1列出了一些具有代表性的聚合物/溶剂系统的值。欧洲杯猜球平台
表1。粒子/溶剂系统的α和β。
聚合物 |
溶剂 |
温度(°C) |
α |
β |
聚丙烯酰胺 |
水 |
20 |
8.46 x 10-4 |
0.69 |
聚丙烯腈 |
DMF |
25 |
3.2 x 10-4 |
0.63 |
聚丙烯腈 |
DMF |
35 |
2.19 x 10-4 |
0.58 |
聚醋酸乙烯酯 |
MEK |
20 |
7.8 x 10-4 |
0.63 |
聚苯乙烯 |
MEK |
25 |
3.1 x 10-4 |
0.53 |
聚异戊二烯氯仿 |
MEK |
20 |
3.5 x 10-4 |
0.42 |
聚甲基丙烯酸甲酯 |
乙酸乙酯 |
20 |
1.61 x 10-4 |
0.48 |
聚乙烯醇 |
水 |
20 |
5.5 x 10-10 |
0.68 |
样本结果
免疫球蛋白G(IgG)冻干粉末(Athens Research)以1%的重量百分比溶解在PBS缓冲液中,然后稀释至10 mg/mL。使用图3所示的条件进行粒径和分子量估计分析。
图3。自动打印/保存菜单。
对样品进行了七次检查,控制菜单设置和显示Mw和粒度结果的最终结果如图4所示。
图4。IgG的大小和Mw结果。
IgG的预期Mw值为145 kDa或1.45e5(道尔顿),单位如图4所示。该值略高于参考值,可能是由于聚合和/或非专家样品制备。
结论
这个Nicomp-DLS系统主要被认为是粒度和zeta电位分析仪。为了确定蛋白质和聚合物的分子量,可以使用改进的和更优选的技术,但是可以使用本文描述的方法计算估计值。
本信息来源、审查和改编自Entegris提供的材料欧洲杯足球竞彩
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