一种替代方法,生物的木糖转换方式检查在欧洲英勇+研究项目。一个假丝酵母酵母菌株被用来从半纤维素水解物木糖转化为木糖醇。
发酵饲料的高效液相色谱分析显示成功转化木糖,木糖醇。早些时候批高效液相色谱实验建议可能SMBC申请这净化的任务。分离在权力平等主义的模式进行聚合物Eurokat列,与目标物质木糖醇洗脱色谱的末期,所有因素允许SMB的过程。
连续色谱方法,SMB色谱法二进制或pseudo-binary混合物分离成纯分数或物质。这个过程会导致更高的收益率提纯物质的同时消耗更少的包装材料和洗脱液,相比传统的批量色谱法。
结果
建立一个SMB过程,分离过程的参数的数量必须先建立。在三个不同温度下分离(40°C, 50°C和60°C)第一次测试。
观察到分离在50°C提供了最有利的结果,因此这是选择了木糖醇的纯化。过载1:2稀释发酵饲料的研究展示了一个几乎基线分离甘露醇和木糖醇。萃余液色谱图划分的分数(木糖醇除外)和提取分数(木糖醇),如图1所示。
一种物质洗脱的死时间系统,因此成立一个开环设置排污口被选中。接下来,列建立了孔隙度和物质的保留时间和用于SMB的设置过程。这些价值观和PurityChrom®软件被用来获得MCC泵的流速以及在此过程中不同的区域(图2)。六个周期后,从萃余液样本,提取和废物收集和检查。
然后,使用快速分析方法(额外的结果,图A1),这个过程是快速评估。更全面的分析显示纯和3木糖醇提取(图3,红色线)。此外,垃圾中没有检测到木糖醇或萃余液(图3蓝/绿线)。
SMB过程有助于净化1.8 g / h是纯度为100%的木糖醇和恢复。批处理相比,SMB过程的收益更大的七倍。
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图1所示。SMB色谱的过程设计发酵饲料的指示两个分数“萃余液”和“提取”;1毫升注射;Eurokat Ca 150 x 20毫米,25 -56µm粒子;欧洲杯猜球平台4毫升/分钟;50°C。
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图2。SMB过程的例子计划设置四个泵,离开水湾,8列,四个区域,表明流率、压力和周期时间;PurityChrom MCC软件。
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图3。叠加分析色谱的萃余液/木糖醇(蓝色),提取/木糖醇(红色)和废物从SMB(绿色)过程6周期;20µL注入;Eurokat Ca 300 x 8毫米+ pre-column;10µm粒子,欧洲杯猜球平台0.5毫升/分钟;75°C。
欧洲杯足球竞彩材料和方法
SMB标准配置包括四个拉®助理ASM 2.1 l 4 P 4.1 s泵和7多位阀门(10/50毫升/分钟)。与SMB烤箱温度控制和流程管理有两个CORI-Flow M13流量计。
净化、8相同Eurokat Ca 150 x 20毫米列(磺化交联styrene-divinylbenzene共聚物)25-56µm粒子。欧洲杯猜球平台Eurokat Ca列300 x 8毫米,10µm粒子和专用分析糖系统(VF欧洲杯猜球平台D0151)被用来执行分析。
结论
使用AZURA®SMB系统,木糖醇纯化高纯度和产量的发酵饲料。净化过程促进显著更高的吞吐量,从而更高收益率的木糖醇作为传统批色谱法。
木糖醇浓度在最初的土豆泥限制了实际吞吐量。因为发达的方法是非常健壮的,分离的两到四倍浓缩饲料应该提供相同的分离结果。
额外的结果
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图A1。比较分离的发酵饲料使用Eurokat Ca列有不同长度的快速、分析方法;蓝色- 2 x 30 x 8毫米(0.7毫升/分钟),红(偏移量= -200)-120 x 8毫米(0.7毫升/分钟),绿色(偏移量= -400)- 300 x 8毫米(0.5毫升/分钟);20µL注入;75°C;
* -木糖醇,* * -甘露醇
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图A2。分析色谱的发酵饲料显示五个确定的物质;20µL注入;Eurokat Ca 300 x 8毫米;10µm粒子;欧洲杯猜球平台0.5毫升/分钟;75°C;
1 -木糖,2 -阿拉伯糖,3 -甘油,4 -甘露醇,5 -木糖醇
表A1。结果的数据提要分析提出了四个复制标准差表示的意思。
|
浓度(毫克/毫升) |
| 木糖 |
38.44±0.13 |
| 阿拉伯糖 |
8.67±0.04 |
| 甘油 |
18.63±0.13 |
| 甘露醇 |
5.59±0.08 |
| 木糖醇 |
61.91±0.34 |
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