Promega ENLITEN®试剂盒在BMG LABTECH微孔板读取器上执行

5’-三磷酸腺苷(ATP)的测定是食品中微生物量测定的常用方法。它也可用于定量血清和组织中的细胞数量。的Promega ENLITEN^®试剂盒，用于ATP检测，使用荧光素酶/荧光素(L/L)快速定量ATP。L/L催化ATP在560nm处的发光反应，ATP为限光剂。

ATP + d -荧光素+ O₂→氧化荧光素+ AMP +焦磷酸盐+ CO₂+光

本实验旨在确定分析检出限(LOD)。Promega试剂盒可以检测10以下的ATP^-16年摩尔(0.1 fmol)。更多信息请访问www.promega.com．

欧洲杯足球竞彩材料和方法

所有的材料都是从欧洲杯足球竞彩制造商那里获得的。

Promega ENLITEN^®装备,蒸馏水，带有注射器的BMG LABTECH酶标仪，酶标板(White 96 well, Costar)

可根据需要使用吸管头、微离心管等消耗品。

实验

所有测定方法和试剂均按照Promega公司的方案进行制备。确保样品不受污染是至关重要的，因为ATP在几乎所有东西中都常见。使用从1000 fmol/孔到0.1 amol/孔的连续稀释，将ATP溶液移液到平板上。测量前，使用酶标仪自带的试剂注入器向每口井注入100µL L/L溶液。使用前，用10%的漂白剂溶液将注入器在注入器和油管中放置30分钟清洗。然后，用蒸馏水彻底冲洗管道，去除漂白剂溶液。

将平板插入仪器后，在发光模式下进行读取，读取参数如下:

BMG LABTECH阅读器参数:

．	．
排放过滤器:	空的(取决于阅读器)
阅读模式:	好吧
获得:	3300-3500(根据型号而定)
不。时间间隔:	20.
积分时间:	0.5秒
延迟:	1

绘制了每个浓度下重复测量值的平均值与空白测量值平均值之间的差值图。对标准曲线进行线性回归得到图1和图2所示的值。

图1所示。线性范围从100 fmol/孔到0.195 fmol/孔。

图2。扩展范围从图1,0-30 fmol/孔。

结果与讨论

ATP试剂盒从100 fmol/孔到0.195 fmol/孔呈线性关系。对数据进行线性回归得到R²值为0.99859。对20个空白样品进行测量，得到138 RLUs的标准偏差。使用这些参数，LOD, LOQ和R²(表1)。

参数	FLUOstar®	LUMIstar®
R2	0.99589	0.99895
LOD	0.81 fmol /好	0.20 fmol /好
定量限	2.70 fmol /好	0.67 fmol /好

该套件附带的资源手册称，它能够从10开始测量ATP^-11到10^-16年计算数据表明，BMG LABTECH酶标仪不仅可以在此范围内工作，而且可以大大降低检测限，超出了线性范围Promega ENLITEN^®ATP工具包。对于FLUOstar/POLARstar仪器系列，使用此试剂盒的ATP LOD约为1 fmol/孔。这是相当合理的，在一般实验室使用的范围内。

由于结果仅从一份文书中获得，因此应仅将其作为代表，而不能反映读者的整体情况。然而，它们对性能给出了合理的估计，结果可能因不同的仪器而异，也可能不异。

此信息已从BMG LABTECH Ltd提供的材料中获取、审查和改编。欧洲杯足球竞彩

有关此来源的更多信息，请访问BMG LABTECH有限公司