凝胶渗透色谱法(GPC)是一种尺寸排阻色谱法可用于“清洁”的复杂混合物,干扰分子从样本进一步使用高效液相色谱法等分析方法,GC或清洁女士这样的样本结果清晰的山峰,这意味着低浓度分析物不是噪音淹没了。以前,清理是手动运行的,这很耗时,并会引入人为错误。然而,KNAUER现在发布了一种自动GPC样品清理系统,使清理操作快速、简单和有效。
AZoM采访了KNAUER的产品经理Maximilian von Delbrück,介绍了GPC清洁背后的理论,KNAUERS的新系统,以及自动样品准备可以给你的实验室带来的好处。
为什么凝胶渗透色谱用于样品清洁?它是如何工作的?
在复杂混合物的许多分析程序之前,必须去除样品中的干扰成分。主要是高分子物质,如脂质和蛋白质。
基于凝胶渗透色谱(GPC)的样品制备根据分子的大小和形状进行分离。柱状物质(固相)具有不均匀的孔隙大小和作为分子筛的作用。大分子由于太大而不能进入柱状物质的小孔而先洗脱。作为分析目标的小分子确实进入了孔隙,并移动了更长的距离,直到离开色谱柱。它们在色谱柱中的保留时间更长。
GPC背后的原则
什么时候应用GPC Cleanup ?
GPC清洗适用于难以用GC-或LC-MS(液相或气相色谱-质谱)分析的样品。对于复杂的样品,如油、饲料和土壤,清洗步骤是减少高含量干扰物质的有效方法。结果表明,MS分析的信噪比显著提高。
对于几个不同的目标分子的多残留分析,GPC是正确的选择,因为分离是基于大小的意义,所有化学上不同的目标分子被收集。相比之下,其他的清洁技术只根据特定的化学性质选择一组分子。
GPC Cleanup是一个既定的方法,根据以下几个准则:
- 方法984.21 - AOAC国际
- sw846方法3640A -美国环境保护局
- aen12393和en1528 -欧洲标准
- L 00.00-34方法符合§64 LFGB(以前§35 LMBG)
您认为GPC样品制备对哪些行业最有利?
一般的清洁方法可用于广泛的样品基质,如食品、组织、植物和环境样品。最成功的应用是橄榄油、坚果和种子、饲料和污泥和废物样品。
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与人工清洗相比,自动化样品制备的好处是什么?
基于GPC的手工制样是一项费时费力的工作。通过自动化样品制备,工作量被限制在样品加载的初始步骤。样品加载后,多达15个样品完全处理,无需人工干预。
GPC清理方法的自动化可以节省人力和时间。此外,清理的再现性和质量得到了提高,并保持在一个恒定的水平。
AZURA GPC Cleanup系统的日常处理情况如何?你能节省多少时间?
在第一步中,用洗脱液对色谱柱进行条件处理。在这个平衡期间,15个样品回路可以被样品填充。加载完成后,对样品进行顺序处理。每个样品自动进样并通过色谱柱。包括高分子量物质的第一部分被送去废料。为每个样品收集产生目标分子的第二部分。集合窗口由预先使用标准组件运行的引用决定。
加载15个样品循环大约需要30分钟。该步骤完成后,系统接管。包括柱的初始平衡和每次运行后的再生,清洗15个样品的总时间约为16小时。通常情况下,AZURA GPC清理系统的用户会在下午加载他们的样本,到第二天早上,所有的样本都准备好了。
AZURA GPC Cleanup系统到底提供了什么?
该系统有15个样品回路,由两个选择阀控制。存储在带有排水系统的托盘中,缠绕的样品回路便于检查和更换。GPC管导向对来自馏分收集阀的出口管进行分类。除了废料,还可以收集15个馏分。用可变单波长紫外检测器监测分离的参比标准组分的洗脱过程。
基于双活塞技术的紧凑泵确保了恒定的流量,这对于高分辨率的GPC至关重要。在运行过程中,泵上的压力传感器监测系统压力。除了注入阀外,还包括一个旁路GPC柱或在两柱之间进行选择的第二个阀。
AZURA GPC清理系统
AZURA GPC清理系统的哪些特性使样品制备尽可能简单?
用户的主要接触点是软件。通用高效液相色谱软件的所有功能,是不必要的复杂的GPC清理。我们使用的是“移动控制”(Mobile Control),这是一款专门设计的控制软件,具有触控优化的用户界面和结构清晰的菜单,以确保直观的操作。
该软件在平板电脑上运行,只需几个指尖就可以远程控制整个系统。这意味着,例如,加载样本循环可以通过按下一个按钮来实现。
当使用GPC清理系统时,如何将样品污染的风险降到最低?
该系统为15个样品提供15个样品回路。每个回路的体积通常为1毫升。每个样品存储在自己的样品回路中,等待注射。因此,交叉污染的风险降低到最低限度。相比之下,自动取样器使用相同的样品回路、油管和注射器来注入所有不同的样品。顶部有许多螺丝接头,增加了结转的风险。
KNAUER有任何GPC清理分离的例子吗?
在我们的网站上有两个应用说明。其中一篇描述了GPC对橄榄油的清理,以用于后续的农药分析。第二点是比较GPC清洗技术和在线固相萃取处理污泥样品。
我们的读者在哪里可以找到更多关于AZURA GPC Cleanup系统和KNAUER?
访问我们的网站,了解更多关于我们的GPC清理系统。如果你有兴趣尝试控制软件,你可以在我们的网站上下载一个演示版本。
如果您想了解AZURA GPC清理系统的规格,请使用下面的链接下载我们的GPC清理白皮书。
下载白皮书获取更多信息
关于马克西米兰·冯Delbrück
2004-2009年,他在拜罗伊特大学学习生物化学,2016年在柏林马克斯Delbrück分子医学中心完成生物化学博士学位。Max于2016年加入KNAUER,担任FPLC产品经理。
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