比率荧光指南

比率荧光是一种测量发射光谱或激发光谱的两个或多个波长的强度，以探测局部环境变化的方法。这通常是通过对特定环境参数(如pH、极性、粘度或离子浓度)敏感的专用探针来实现的。

比率计染料

比率染料用于定位探针敏感性质，如离子浓度，可以通过测量动力学或光谱来使用。

在Fura-2的光谱中，可以看到荧光激发有两个峰。这些峰直接反映了溶液中游离离子钙的结合。在高游离离子钙浓度下，340nm的激发峰相对较高。当游离离子钙浓度较低时，380nm处的激发峰相对于340nm处的激发峰增大。

图1所示。呋喃-2在含0 ~ 3.4 μM游离Ca2+溶液中的荧光激发光谱。(HORIBA PTI QuantaMaster系列，2017)

通过检查这些峰的两个激发波长的强度比，可以看出这与细胞内游离离子钙浓度直接相关。

此外，通过测量荧光在510 nm处的比率，当在340 nm和380 nm处激发时，时间将提供一个基于时间的图，显示溶液中钙离子浓度的变化。该方法用于测定细胞对游离离子钙的摄取。

荧光光谱

其他的探测器也有荧光光谱其变化方式与物理性质相同，如其他离子（例如，钠、镁和钾）的浓度和溶剂极性pH值。

上面的图表突出了这个比率，显示了细胞内钙是如何对充满呋喃-2的心房细胞作出反应的。在这种情况下，通过检查两种强度随时间的比率，可以将钙离子的浓度与动力学曲线联系起来。

图2。呋喃-2负载心房细胞的Ca2+反应

本信息来源、审查和改编自HORIBA Scientific提供的材料。欧洲杯足球竞彩

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