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液相色谱法是一个分析技术用于分离组件混合使用液体流动相固体固定相。色谱的极性取决于使用的模式感兴趣的分析物。
两种最常见的类型的液相色谱法包括正常阶段和反相色谱法,但现在亲水相互作用色谱法(HILIC),这是一个复杂的色谱法,已经得到普及,许多优势在更传统的液相色谱技术。
亲水相互作用色谱法是如何运作的吗
亲水相互作用色谱法是一种液相色谱的代码,主要用于分离极性化合物。
HILIC第一次出现时,它被认为是一种新型的色谱正常阶段,然而,现在,它被认为是更复杂的比仅仅是另一种类型的正常相色谱法。HILIC确实使用极性固定相色谱法在正常使用阶段,但就像使用的流动相,在反相色谱法。
像其他色谱模式,HILIC有一系列不同的静止阶段,包括石英、pentafluorophenyl和pentahydroxy阶段列。通常HILIC的流动相乙腈与一小部分水,虽然其他溶剂与水混相,如四氢呋喃,也可以使用。以乙腈为溶剂意味着列内的脂质双分子层不得中断,因为它可能是如果一个酒精使用流动相。在流动相添加剂,如醋酸铵和甲酸铵可以添加到控制pH值和离子强度。
HILIC的模式工作并不完全理解,但它被认为工作由极性分析物分区的水吸附在固定相表面的层。偶极子静电相互作用也被认为参与HILIC是如何工作的。
HILIC的优点和缺点
有很多优势HILIC的其他种类的色谱法。这些包括:
- 使用它,而不是反相色谱法当分析物不被保留在一个列。
- 克服溶解度的问题发生在正常色谱法由于极性性质的技术。
- 高灵敏度,搭配质谱由于流动相离子的溶剂化作用。
- 高度兼容的固相萃取的方法将有机溶剂组成。
- 腰的压力由于低粘度的溶剂使用。
- 高流率可以用流动相的低粘度。
- 几种类型的固定相。
HILIC的缺点
没有很多缺点使用HILIC在其他类型的色谱如果HILIC套装感兴趣的化合物,但也有一些缺点需要考虑。这些包括:
- 非常依赖乙腈作为流动相。
- 选择移动阶段乙腈被证明是有问题的使用电喷射时积极的电离和与紫外检测系统不兼容。
- 峰形状可以受到大量注入的乙腈溶剂。
- 更复杂的使用比其他液相色谱技术。
HILIC的应用在多个行业
HILIC可以在广泛的领域来分析极性化学和生化分子。使用字段HILIC包括药理学、生物化学、食品工业和农业。
最常见的区域分析是药物及其代谢物,但HILIC也被用来分析碳水化合物、多肽、抗生素和杀虫剂。HILIC分析生物样品的使用增加了,因为样品制备时寻找代谢物很简单,正如代谢过程使用的极组。
HILIC的应用在每个字段包括:
- 药理学:分析药物及其代谢物。
- 生物化学:代谢途径和疾病的生物标记物。
- 食品工业:肽图、维生素、污染物和毒素。
- 农业:环境毒素和极性分析物在植物提取物。
引用和进一步阅读
Buszewski, b和Noga,美国(2011年)。亲水相互作用液相色谱(HILIC)——强大的分离技术。分析和分析化学402 (1),pp.231 - 247。
希顿,詹姆斯和史密斯,诺曼。(2012)。HILIC的优缺点;一个简单的概述。今天色谱。5。44-47。
Rodriguez-Gonzalo,大肠和Garcia-Gomez d (2018)。亲水相互作用色谱法:当前的趋势和应用程序。参考模块在化学、分子科学和化学工程。欧洲杯线上买球
https://www.news-medical.net/life-欧洲杯线上买球sciences/Hydrophilic-Interaction-Chromatography-Applications.aspx
https://www.chromacademy.com/
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