原发性纤毛运动障碍的断层扫描

层析成像是生命科学中结构研究的重要组成部分，已被广泛应用欧洲杯线上买球^1,2．在这里，进行断层扫描的应用以协助准确诊断原发性睫状体蛋白酶（PCD）。

PCD属于一系列基因上异质疾病的动机纤毛，然而，在很大程度上，在很大程度上还包括编码睫状体葡萄球菌的基因中的突变^3.．

通常，在诊断疑似PCD的情况下，工作流程需要扫描巨大的塑料树脂嵌入和/或大面积的塑料树脂嵌入和传统上染色的薄片，同时搜索通过纤毛的轴向横截面，从中进行诊断。纤毛的几乎完美轴向截面的相对较低的外观有动力调查和问题，可以将断层扫描应用于该领域并有助于加速诊断？虽然断层扫描以前已应用于PCD⁴在美国，它还没有作为标准诊断工具应用。

来自培养的人类受试者和患PCD的患者的培养上皮细胞的标本浸入2％多聚甲醛中，用2％的戊二醛和0.5％磷酸盐缓冲蛋白鞣酸;已知最适合稳定和修复微管结构。进行乙酸铀酯和柠檬酸铅的银段后染色以进行显微镜检查。断层扫描是使用a进行的透射电子显微镜使用SerialEM获得倾斜系列(1.5-2°间距+/- 60°)，在120 kV下运行。⁵．倾斜系列的后续处理使用IMOD进行⁶．

图1。健康(左)和pcd患者(右)上皮刷边界未着色视图。

图1显示了一系列来自健康和多纤毛pcd病例的上皮刷边界图像域。通常情况下，从倾斜系列中未倾斜的视野不足以做出准确的诊断，因为纤毛无法揭示原型模式。

图2。健康个体夜晚（左）的纤毛重建的特写镜头，并倾斜以揭示用于诊断（右）的原型典型视图。选择重建的倾斜，以揭示左上纤毛中的图案。

图2展示了使用健康个体倾斜数据生成的三维重建的特写。这张图清楚地显示了几根纤毛的横切面。然而，3D重建可以简单地在计算机中倾斜，以展示原型模式，其中包括动力蛋白臂的连通性。

图3。如图2所示，但现在来自PCD案例。

同样，图3展示了pcd情况，此时断开的动力蛋白臂重建的倾斜分辨率是清晰的。值得注意的是，每个病例的数据采集时间不到30分钟，重建时间也不到30分钟，这表明诊断时间不到1小时。这一重要数据说明了应用断层扫描诊断PCD病例的概念。

参考资料及进一步阅读

1. 刘志强，电子断层扫描技术在细胞内三维可视化中的应用，第二版，施普林格，纽约(2006)。
2. 《细胞电子断层成像:细胞生物学方法系列》，第79卷，Elsevier，阿姆斯特丹(2007)。
3. Leigh，MW等人，医学遗传学11（2009）473。
4. O'Toole，E.T.等，microsc。微肿瘤。14（4）（2008）1476CD。
5. Mastronarde, D.N Microsc。微肛门。9(增刊2)(2003)1182CD。
6. Kremer J.R.等，J. STRACH。BIOL。116（1996）71。

致谢

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**北卡罗来纳大学教堂山分校，Chapel Hill NC 27599。

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