用于测量溶液中蛋白质纯度的最常见技术之一,并分析蛋白质特征是观察样品对光的紫外线(UV)波长的吸收。
图像信用:jordi实验室
含有合适的氨基酸的蛋白质是光吸收的UV谱,特别是具有260-280纳米(Nm)的峰值波长的光。
这使得分析许多蛋白质特性并相对于标准或通过利用预定义的消光系数来测量浓度。jordi实验室将专注于利用紫外光吸光光谱作为在本文中建立蛋白质特征的技术。
具有紫外光吸收的成像蛋白质特征
有两种氨基酸主要负责蛋白质的UV吸光度:酪氨酸和色氨酸。两者都具有280nm波长的摩尔吸收系数,但蛋白质本身的峰值吸光度大大通过线性链内的这些特异性氨基酸的布置和浓缩来确定。
随后,蛋白质的最大和最小紫外光吸光度随氨基酸组合物的函数而变化。这提供了一种测量未知样品或蛋白质混合物中已知蛋白质和氨基酸浓度的纯度的基本技术。
使用光谱仪直接测量UV吸光度是量化溶液中蛋白质量的最简单方法。测量吸收的程度,而样品暴露于具有260-280nm的波长的UV光。
该方法是简单,快速测量含有酪氨酸和色氨酸芳香链的纯蛋白质的理想选择。
随后,不适合分析不含酪氨酸和色氨酸的样品的蛋白质特征。通常,205nm的峰值波长用于通过光谱询问这种核批量样品UV-Vis光谱。
用jordi实验室测试蛋白质特征
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