酵母生长和活力的稳定监测是发酵过程的关键要素。ASBC血细胞计数计数技术是最常用于进行此类观察的方法。
在该方法中，一旦从发酵容器中除去并用亚甲基染色，就使用血细胞计数点以手动计数样品。
虽然这种技术是众所周知的并且被广泛记录，但充其量是基于非常小的样本计数的猜测。当使用显微镜监测时，血细胞计计显示了测量区域的网格，如下所示。
图1。图像信用：横川液成像技术，Inc。
由于操作员进行手动计数所需的时间，仅计算少量实际网格单元，其将结果插值为平均数。
样品大小非常小，产生低统计学意义。已经确定，可以通过对操作员的有限了解，预期高达25％的错误。
本文的目的是呈现一种技术流动成像显微镜为了提高酵母计数的精度，消除时间的限制，并限制在这个过程中操作错误的可能性。从而通过覆盖更大的样本来提高统计显著性。
方法
流量计®，流动成像显微镜专为该过程的最佳自动化而设计。它可以在使用血细胞计量技术中仅计算几十个细胞时，计算成像和量化数千个单独的酵母细胞。
流动的VisualSpreadsheet可以自动进行生活，死亡和萌芽酵母细胞®软件无需涉及运营商。这在消除人为错误时产生极其精确和可重复的结果。由于流量计捕获的数据广泛群体，结果具有更大的统计学意义。
与血细胞计数计技术一样，酵母样品被取出发酵容器，随后通过用亚甲基染色它们来制备。随着自动图像模式的流量计，然后在其通过流动单元移动时在每秒七个框架下处理样品。每种酵母细胞进行成像，保存和量化。
图2。图片信用：Yokogawa Fluid Imaging Technologies，Inc。
如图2所示流量计从流体流动时立即捕获每个酵母细胞作为单个存储的图像。在整个样品运行过程中，超过40个形态特征被指向奇异细胞的图像。
死细胞将吸收亚甲基蓝色污渍，从而导致其被相机捕获的蓝色外观。下面图3显示了如何在血细胞计数器中计算细胞。
图3。图片信用：Yokogawa Fluid Imaging Technologies，Inc。
通过利用用于小区图像的“与多种形状测量结合时，使用流量计可以使用流量计来利用”平均蓝色“值来利用”平均蓝色“来利用”平均蓝色“来易于使用流量来区分生物。
“萌芽”的细胞提出了一个更复杂的挑战，因为该事实是为了从“萌芽”单元所需的分辨率所需的分辨率，比“萌芽”单元格差异远大于流量计所能实现。
对这一挑战的简单解决方案是识别“双峰”，这是两个酵母细胞已经“芽”并将分开。量化“萌芽”单元格时，运营商主要搜索酵母仍在增长和扶合的迹象。
为了量化出芽和发现双生子，系统应该被过滤，每个双生子应该被计数为两个“活”细胞和一个“出芽”细胞。在这种情况下，趋势是相对于实际数字的关键度量。
结果与结论
下面的图4展示了流量计如何自动建立生活，死亡和萌芽酵母细胞的数量。在短短35秒内，流量计在此实验期间自动分类了8,709酵e细胞。
图4。图片信用：Yokogawa Fluid Imaging Technologies，Inc。
与血细胞计计数相比，流量计执行细胞的精确计数，而不是在外推上建立的预测。作为系统的一部分，每种类型的细胞的浓度自动计算流量计．由于大量的数据，使用FlowCam获得的结果具有更大程度的统计学意义。
随着人的解释错误，流量计结果在多个运行中产生高度的精度，具有有限的变异性，其通常低于1％。
如前所述，用于表征酵母细胞的过滤器只需要定义一次。一旦确定了，可以为所有后续样本回收过滤器。
VisualSpreadsheet允许轻松定义过滤器。用户可以通过按下它们来确定所需类型的粒子图像，指示软件将其保存为过滤器。
利用统计模式识别，滤波器然后容易地定位类似的粒子。欧洲杯猜球平台在此阶段之后，分析完全是自动的。
这些信息已采购，审核和调整由横川流体成像技术，Inc。提供的材料。欧洲杯足球竞彩
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