使用板读取器进行比率分析

SC-41读取器使用Microwell板的自动测量值促进了FS5光谱仪上的高通量测量值。可以测量最多384孔的标准和自定义板。SC-41 I的独特功能之一是它实现光谱和寿命测量的能力。本文强调了SC-41读板读取器的独特功能，在进行比率分析时，可以测量包含不同比率荧光团比率的样品的发射光谱。

图1。FSS光谱荧光计的SC-41读取器样品模块。图片来源：爱丁堡乐器

实验装置

两个解决方案，荧光团1（F1）和荧光团2（F2）如表1所示，用50:50的乙醇/水溶液以各种F1和F2比例制备，如表1所示，用于产生校准曲线的样品1至6具有已知的F1：F2比率，而U1则是U1U2具有未知的F1：F2，尚未实验。使用移液器将总共300 ul的每个样品转移到Greiner 96井板上。

表格1。示例细节。资料来源：爱丁堡乐器

样本	％荧光团1	％荧光团2
1	100	0
2	80	20
3	60	40
4	40	60
5	20	80
6	0	90
U1	未知	未知
U2	未知	未知

SC-41排放测量

当插入FS5 SpectroFluorometer的样品室中时，SC-41样品模块会自动识别。使用卸下板/装载板按钮，将填充的微孔板加载到SC-41中。

如图2所示，井显示为单数圆圈，右键单击的井将板读取器移至该位置，该位置显示了井的实时发射率。在记录最终测量之前，用户可以验证包括带宽在内的测量参数。左键单击井中以蓝色突出显示并准备测量。还可以节省和加载井的测量模式，以供将来使用。

图2。展示样品模块的自动识别（以红色概述）以及带板载荷的井盘示意图（以紫色概述）。图片来源：爱丁堡乐器

选择井A1-A8进行测量，并通过将板读取器移至发射最高的样品来确定带宽。这有助于防止探测器饱和。从480 nm到750 nm的发射光谱扫描标记为0.5秒的整合时间和1 nm步骤。

图3。SC-41板在荧光片中设置。图片来源：爱丁堡乐器

在整个测量过程中，与微孔板的示意图一起显示了活发射扫描，该示意图突出了所测量的井，如白色圆圈带有红色轮廓所示（图4）。一旦单个井测量完成，圆就变为正方形，并且在完成所有测量时，示意图关闭。

图4。SC-41读取器的实时测量屏幕。图片来源：爱丁堡乐器

比率趋势分析

使用荧光^®趋势分析，使用比率分析对光谱进行分析。选择比率分析，并输入F1和F2的发射峰波长。然后计算强度比。

如图5所示，选择了已知荧光团浓度比的样品1至6，其比率被输入为一个百分比。使用此数据，荧光素^®产生了二次校准曲线，该曲线确定了两个未知样品的荧光团比。

图5。比率趋势分析使用荧光素。图片来源：爱丁堡乐器

应用荧光器产生的方程式^®，确定未知1（U1）的百分比比例约为74.8％F1和25.2 F2。未知2（U2）包括50.5％F1和49.5％F2的混合物（表2）。

表2。未知的荧光团比率。资料来源：爱丁堡乐器

样本	％荧光团1	％荧光团2
U1	74.8	25.2
U2	50.5	49.5

结论

这SC-41读取器使用FS5光谱荧光仪和微孔板促进自动测量。

荧光片^®趋势分析特征用于生成和绘制校准曲线，该曲线揭示了未知样品中F1：F2的比率。

此信息已从爱丁堡仪器提供的材料中采购，审查和改编。欧洲杯足球竞彩

有关此消息来源的更多信息，请访问爱丁堡乐器。