赞助者爱丁堡工具2023年9月OliviaFrost评论
分子信标探针是核素序列(RNA和DAD组件),可用于荧光检测特定序列RNA或DA
图1显示分子信标数小核酸基数(从5到7)序列终端相补并成对
图1分子信标探针图片感想爱丁堡工具
干块组成,创建无偏基循环,称为干或发圈循环最后,核素序列一端有共价加含氟磷和二端有荧光消火
当分子信标以发状形式出现时,水槽通过FörsterResonance能量传输解析大量减少Floyphore的荧光
核素序列对分子信标循环有补充基础被称为补充式脱氧核糖核酸分子信标理发圈与cDNA混合生成双串序列,图2显示
图2分子信标和cDNA反应a)CDNA,b)分子信标和c)混合成双线序列
混合法提高含氟磷与开源器之间的距离,直到含氟磷排放不再解密CDNA的存在可以通过监测含氟磷荧光变化来确定和量化
分子信标探针可定制面向特定RNA或脱氧核糖核酸序列,使分子信标实时检测和量化RNA和脱氧核糖核酸
现实世界应用包括Vivor RNA检测、PCR量化、病毒负载量化、病原体检测和核酸蛋白交互检查
分子信标与样本温度控件和敏感分光计相结合使用允许测量RNA或脱氧核糖核酸不足浓度
文章讨论如何使用分子信标量化cDNA纳米模集值,同时使用爱丁堡工具FS5分光度计控制温度并测量样本释放
实验搭建
分子信标和CDNA均从Merck获取所有测量均使用爱丁堡工具FS5分光计进行,该工具配有SC-274波位控制样本模块
SC-27用于加热并单调四种溶液,并有各种聚积cDNA和分子信标FS5xenon灯用于激起信标,使用PMT检测器检测到光辉
四种溶液用分子信标集中度100纳米和以下cDNA集中度0NM、20NM、40NM和60NM分析
图3fs5光谱计SC-27样本持有者
温度依赖海平开机
分子信标和cDNA混合作用可能发生时信标以闭合发素形式出现,但它会缓慢发展混合化过程可加速化,先加热分子信标以打开理发结构
树干基对理发结构的吸引力因热力而弱化,过程命名为折叠或融化,理发院开机可使用依赖温度荧光调查开口温度依赖性,如图4所示
图4分子信标在不同温度下的荧光强度 图像感想:爱丁堡工具
FS5辉煌®软件使用温度控样模块时自动获取温度图
图4显示的荧光温度映射图通过将样本加热20分钟获取,同时点火确保样本均匀加热20分钟后测量排放频谱后再继续温度
荧光强度随着温度上升而增加 开发素和下降FRET排查.显示60摄氏度足以完全开理发素,60摄氏度的排放量为20摄氏度的50倍
基于这些发现,60摄氏度被选为检测脱氧核糖核酸的孵化温度
检测脱氧核糖核酸
分子信标四大解析法相异cdna浓度被插入cvettes并置入SC-27的四个位置解决方案孵化,使cDNA和信标序列混合
孵化法加热到60摄氏20分钟后冷却到20摄氏20分钟热冷能提高cDNA和分子信标混合率,图5显示
图5CDNA和分子信标混合过程表SC-27.图片感想爱丁堡工具
启动后,四种溶液的荧光谱按顺序测量并显示于图6中SC-27方便自动测量四样参数相同的样本
分子信标专用解析法显示其特征排出而无cDNA
荧光强度随着CDNA增聚而提高,因为信标与cDNA混合化和信标含氟光谱解解锁
图6分子信标解决方案光谱显示cDNA的不同集中度
了解已知cDNA富集度样本的荧光强度可确定cDNA和荧光强度之间的数学关联
使用Fluoracle趋势分析特征®图6中的测量用法生成标定曲线,516nm峰值排放强度与cDNA浓度相关联,图7显示
图7CDNA集中趋势分析
发现荧光强度和cDNA集中度之间的线性关系并用下列方程描述
Y=1.076x105+6.024x102X级
Y表示516纳米时的荧光强度,X表示nm中cDNA浓度
从此数学方程中,CDNA在未知样本中的集中度可用其荧光强度计算
为了证明这一点,对CDNA和100NM分子信标集中度未知样本进行了孵化测试,并测量516NM返回cDNA浓度27nm,如图8所示
图8CDNA已知浓度样本(Oange点)和未知cDNA浓度样本(红圆)校准曲线图片感想爱丁堡工具
结论
上头FS5分光度计由爱丁堡工具制作,用分子信标探针测定未知的DNA集中度,按纳米模排序
SC-27四位控制样本模块用于编译脱氧核糖核酸和探针解决方案,测量四种解决方案的荧光强度自动化趋势分析FS5Fracle®软件用于分析结果
FS5分光度计提供最优分辨率、敏感度和获取速度,在分析和研究市场提供最高测量规范
深入了解FS5分光度计或爱丁堡工具对荧光强度和消毒的研究,联系公司销售团队[email protected].
欧洲杯足球竞彩这些信息取自爱丁堡工具提供的材料并经过审查修改
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