在过去的十年中,已经进行了相当大的技术改进来修复受损的骨骼和组织。诸如臀部植入物和支架的器件是广泛用于修复和纠正问题的装置,这些问题难以修复过去。
体内植入物的生物相容性是微观检查的主要关注和主要原因。必须成功植入骨骼或组织接受植入物并且不会拒绝入侵。虽然同时,外科植入物暴露于身体的生化环境,这可能导致降解。为了评估兼容性,重要的是进行微观分析的任何制备技术,防止骨骼或组织损伤,同时保持植入物的完整性。
骨是海绵状的,可以再生,因此可以随时间改变体积。另一方面,植入物是坚硬的,不会改变体积,而且会在体内降解导致失效。材料硬度的不同,即硬植入物与软组织或骨质的不同,使标本的制备成为一个挑战。
检查骨骼和组织样本
骨头和组织有两种不同的研究方法。薄片用于显微放射照相和透射光观察。用反射光观察大体积试样的截面。薄片是更常见的,并提供相当多的信息比散装标本,并将详细讨论。
骨和组织样本植入检查
含有植入物的抛光薄部分可用于传输和反射光检查。由不透明的植入物通过反射光检查,用于诸如孔隙率,粒度和腐蚀等特征。在透射光中检查透明的骨或组织。蜂窝特征,如骨升和haversian运河,在薄部分中更清楚地显示其结构细节。用抛光的部分更好地观察到金属植入物中的孔,涂层(HA)和腐蚀的特征。
透射光中骨薄截面的微观结构。暗区是植入物。
通常,石蜡方法用于制备脱钙化骨和软组织,其中样品用切片体切割。然而,不能有效地用于含有植入物的骨或组织的切片体,因为切片机刀可以容易地损坏。受损的刀会导致组织的撕裂,损坏样品。当脱钙骨切片时,切片体也可能导致折叠,收缩或微裂缝,使微观检查难以。
准备骨/组织薄片
- 切割样品以产生约2mm薄截面,优选使用精密金刚石锯。洗涤,彻底干燥,并在真空下将样品嵌入EPHothin®低粘度环氧树脂中。
- 固化后,用600和800砂砾(P1200和P1500)Carbimet®磨料磨削一侧,直到整个表面暴露和平坦。
- 彻底清洁并擦干样品和滑块。使用环氧树脂或氰基丙烯酸胶胶将地面连接到滑块。氰基丙烯酸酯必须非常仔细地使用,因为它非常迅速地治疗,如果没有正确处理,可以将手指粘合到滑块上。与塑料幻灯片一起使用时,氰基丙烯酸酯胶水最佳。使用玻璃载玻片时,用600砂砾(P1200)磨料在附着试样之前将表面研磨,将改善粘合力。
- 当使用环氧树脂获得良好而均匀的薄粘结剂时,将载玻片放在PetroBond™中,在固化时施加压力,或通过其他方式施加压力。确保环氧树脂不接触到任何部分的粘接夹具。将PetroBond™置于温度为113-122°F(45-50°C)的热板上2-3小时。加热会加速治愈周期。如果不加热,环氧树脂可能需要24小时或更长时间才能固化。
- 当环氧树脂完全固化时不能通过指甲缩进,将滑块冷却并冷却至室温。
- 对于医疗应用,应首先用ISOT®精密锯首先切割含有植入物的样品,然后用Petrothin®薄切片系统接地。将样品与其中一体的ISOME®锯片不仅节省样品,而且最小化组织损伤。Petrothin®所需的较厚的刀片可能对植入物和组织造成损伤。
如果样品必须手工研磨,请使用更粗的磨料,如320-400沙砾(P400-P800) carbmet®圆盘。将试样磨成大约125µm的厚度。使用更细的磨料,如600和800粒度(P1200-P1500) CarbiMet®disc,进一步减少厚度,直到大约20-50µm的厚度或直到细胞细节变得清晰。研磨厚度小于50µm的试样时,必须非常小心。
注:显微摄影时,以80 ~ 100µm厚为宜;但用透射光观察时,切片厚度应在20 ~ 50µm之间,或磨平,直到细胞细节清晰后方可观察
- 使用3μmmetadi®钻石浆料在Texmet®1500或尼龙抛光布上进行抛光。使用Metadi®流体作为润滑剂。
- 如果需要,样品可以在MasterPrep™Alimina抛光悬吊液MasterTex®抛光布上进行短暂抛光,以去除划痕。
用平行面制备样品
在准备薄片时,保持顶部和底部表面彼此平行是有用的,特别是当标本要用于微射线照相或用透射光显微镜检查时。为了保持平行度,可以使用PetroThin®薄片切割系统等半自动机器,或使用特殊支架在旋转轮上手动准备样品。PetroThin®薄片切割系统旨在制备精确厚度的薄片。它的使用确保了一致的结果。
如果通过手工制备试样而不借助特殊持有者,则遇到以下问题。
为了最小化上面提到的一些问题,用手动制备,使用诸如组织精密研磨夹具(部分号60-8087)的支架有助于使用。夹具具有碳化物停止,防止标本过度地。夹具设计用于宽度为27×46mm的载玻片,不能适应其他尺寸的幻灯片。
2020欧洲杯下注官网准备骨头的设备?植入薄片
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ISOR®系列线性精密锯 |
Petrobond®薄件粘接夹具 |
Petrothin®薄切片系统 |
消耗品* |
IsoMet®金刚石晶圆刀片 |
EPOTHIN®低粘度环氧树脂 |
CARBIMET®磨具 |
TexMet®1500抛光垫 |
meadi®钻石膏(3µm) |
MetaDi®流体 |
Mastertex®抛光布 |
MasterPrep™氧化铝抛光悬液 |
该信息的来源、审查和改编自比勒提供的材料。欧洲杯足球竞彩
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