Dermorphin是一种阿片类化肽肽，是从南美青蛙的皮肤分泌物获得的衍生物。与吗啡1相比，它是镇痛药的30-40倍。通过提供对蛋白酶介导的降解的抗性，存在氨基酸D-丙氨酸的存在使皮肤具有独特的。
虽然d -氨基酸肽因其在拟肽类药物设计和低免疫原性反应方面的应用而成为首选，但它在赛马中的应用推动了它的普及。去吗啡的止痛特性被用于提高赛马的表现，超过其物理极限，从而造成动物的伤害。由于这一事实，国际比赛专员协会的模型规则已归类为第一类违禁物质。
由于相关的复杂基质和建立的标记的内标，量化的Dermorphin是一种难以分析的难以分析。本申请说明介绍了使用的二肢尿液中皮肤的定量分析EVOQ ELITE模型LC三重四极杆质谱仪。测定的线性动态范围为0.05-100ng / ml，使得能够实现所需的低定量限制（LLOQ）为0.05 ng / ml。
实验
色谱法(推进高效液相色谱法)
- 色谱柱:C18, 3µ，2.1x100mm (ACE 3µ，C18, 100x2.1mm)
- 流量:0.4毫升/分钟
- 注入量:40µL
- 流动相A:水加0.2%甲酸
- 流动相B：乙腈，甲酸0.2％
- 梯度条件：
- 0.00min 5％b
- 0.20分钟5% B
- 8.00分钟95% B
- 8.50分钟95% B
- 8.51min 5％b
- 12.50分钟5% B
质谱（EVOQ Elite）
- VIP加热-ESI温度：350°C
- 雾化器气体：70个单位
- 加热气体:70单位
- 锥气：10个单位
- 锥形气体温度:250°C
- 主动排气：上
- 喷雾电压：+4000 v
- 革啡肽和革啡肽II的MRM(内标):
- M / Z 803.4> 602（CE = 20V），量化离子
- M / Z 803.4> 202（CE = 32V），限定符离子
- M / Z 783> 277（CE = 40 V），内标
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图1所示。Bruker Evoq.
结果和讨论
的EVOQ Elite三重四极杆质谱仪建立了马尿去吗啡素的测定方法。采用固相萃取法制备马尿样品。该方法可在0.05 ~ 100 ng/mL之间进行准确定量。图2为马尿中0.05ng/mL去morphin的MRM色谱图。
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图2。在0.05ng / ml（LOQ）的牙啡的色谱图和马尿中的Deltorphin（绿色痕量）。
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图3。马尿中去吗啡素校正曲线，范围为0.05-100ng/mL
表格1。显示了低、中、高QC水平的响应因素，RSD%为7.3%，说明了强大的离子源性能，因为消除了用于防止基质污染到离子源的转移阀。
表格1。:给QC的响应系数%RSD
| 质量控制 |
浓度（ppb） |
面积比例 |
响应因子 |
| 低质量控制 |
0.3 |
0.01000. |
0.03335 |
| 低质量控制 |
0.3 |
0.01031. |
0.03438 |
| 中期质检 |
6．0 |
0.22314 |
0.03719 |
| 中期质检 |
6．0 |
0.17834 |
0.02972 |
| 高QC |
50.0 |
1.67945 |
0.03359 |
| 高QC |
50.0 |
1.62102 |
0.03242 |
| 响应因子RSD |
7.3％ |
这些信息已采购，审查和调整Bruker - Chemical and Applied Markets提供的材料。欧洲杯足球竞彩
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