静态光散射(SLS)器件主要有四种类型:直角光散射(RALS)、低角度光散射(LALS)、混合光散射/LALS和多角度光散射(MALS)。本文将详细介绍这些工具。gydF4y2Ba
文化、制度gydF4y2Ba
最简单的光散射仪是RALS设备,它测量入射光在90°处的散射光强,如图1A所示。通过测量的强度和样品浓度,可以直接计算出样品的分子量。在图1B所示的Zimm图中,散射光强度是在远离y轴的地方测量的。gydF4y2Ba
图1所示。gydF4y2Baa . RALS探测器示意图,显示通过流动单元的流动。来自激光器的光从细胞的末端进入,并在90°处被收集。B.当使用RALS时,德拜图被简化为一个点,假设每个角度都相等,因此等于1/Mw。gydF4y2Ba
RALS系统的优点和限制gydF4y2Ba
以下是RALS系统的一些优点:gydF4y2Ba
- 它是一种简单的仪器,不涉及任何复杂的光学。它的特点是流动单元的一侧有一个窗口,使单元有一个小的体积。gydF4y2Ba
- 当光线以90°的角度收集时,任何由折射率变化产生的噪声或耀斑都会减少。gydF4y2Ba
- 这种低噪声意味着仪器具有最佳灵敏度和良好的信噪比gydF4y2Ba
RALS系统的一些局限性包括:gydF4y2Ba
- 该仪器基于散射光强在90°和0°时相同的假设进行测量。这对任何在光线中表现出明显角度依赖的分子来说都是不正确的。因此,RALS探测器不能对带有R的分子进行准确的分子量测量gydF4y2BaggydF4y2Ba>≈15海里。gydF4y2Ba
- 由于测量是在一个角度进行的,所以不可能使RgydF4y2BaggydF4y2Ba由于齐姆图上直线的斜率的计算是不可测量的。gydF4y2Ba
lal探测器gydF4y2Ba
如图2A所示,LALS装置以尽可能靠近的角度测量散射光强度,如图2A所示。这意味着估计的分子量值将非常接近分子的实际分子量。从图2B所示的ZimM图中,LALS测量非常靠近轴,最终非常接近Y截距,这意味着通过在7°处测量误差是最小的。gydF4y2Ba
图2。gydF4y2BaLALS检测器的示意图,示出了通过流动单元的流动。来自激光的光进入电池的末端,并以低角度通过相同的出口窗口收集。7°。B.当使用拉尔尔时,将DEYBE图减少到单点,其非常靠近Y轴,因此对于所有分子等于1 / MW。gydF4y2Ba
LALS探测器的优点和局限性gydF4y2Ba
LALS检测器的一些优点包括:gydF4y2Ba
- 非常精确的分子量测量,LALS测量的散射光强度非常接近Zimm图的轴。gydF4y2Ba
- 一个专用的LALS探测器可以有一个很小的流单元,因为它只需要适应一个测量角度。gydF4y2Ba
- LALS原理适用于任何分子的分子量测量。gydF4y2Ba
LALS探测器的局限性如下:gydF4y2Ba
- 由于LALS探测器以单一角度测量散射光,因此不能测量Rg。gydF4y2Ba
- LALS探测器的灵敏度低于RALS探测器,对弱散射样品的测量无效gydF4y2Ba
- 由于散射光和激光之间的距离非常近,因此需要在不收集入射激光的情况下对散射光进行测量。gydF4y2Ba
- LALS探测器易受污染的影响,因为污染颗粒通常很大,因此主要散射在向前方向上。欧洲杯猜球平台gydF4y2Ba
然而,现代专用LALS设备可以隔离散射光从入射光,从而降低噪音和表现出优越的灵敏度。gydF4y2Ba
RALS / LALS混合检测器gydF4y2Ba
RALS仪器可以测量微小的各向同性散射体,LALS探测器可以提供大分子分子量的精确测量。RALS/LALS杂交将这两种测量结果集成到一个单细胞中,如图3A所示。gydF4y2Ba
在图3B所示的Zimm图上,RALS设备用于测量各向同性散射的∼15nm阈值以下的分子尺寸,而LALS系统用于测量各向同性散射的∼15nm阈值以上的分子尺寸。软件根据检测信号自动从LALS切换到RALS。gydF4y2Ba
图3。gydF4y2Baa . RALS/LALS混合检测器示意图,显示通过流单元的流量。来自激光器的光从细胞的末端进入,并以90°的角度收集,并以低角度(如7°)通过同一出口窗口。B.当使用RALS/LALS时,Debye图减少到两个点,其中RALS值用于最大化各向同性散射体的灵敏度,LALS值用于最准确的各向异性散射体的分子量。gydF4y2Ba
RALS / LALS混合检测器的优点和限制gydF4y2Ba
以下是RALS/LALS混合探测器的优点:gydF4y2Ba
- RALS探测器为小分子提供了优越的灵敏度。gydF4y2Ba
- LALS探测器对较大的分子提供了优越的灵敏度。gydF4y2Ba
- 可以在软件中同时比较两个角度,以获得色谱图上每个点的最佳数据。gydF4y2Ba
- RALS / LALS杂交需要只需要一个非常小的流动单元。gydF4y2Ba
- 来自两个角度的数据的组合使得线上的线路倾斜可测量,从而提供对RG的良好估计。gydF4y2Ba
以下是RALS / LALS混合探测器的局限性:gydF4y2Ba
- RgydF4y2BaggydF4y2Ba计算精度有限gydF4y2Ba
- 当GPC/SEC系统不干净时,LALS数据可能会有噪声gydF4y2Ba
mal探测器gydF4y2Ba
图4。gydF4y2Baa . MALS检测器的原理图,显示通过流动单元的流动。来自激光器的光从细胞的末端进入,散射光以不同的角度离开。散射光被多个探测器收集。B.当使用MALS时,完成德拜图并外推回0°。分子量由截距和R计算gydF4y2BaggydF4y2Ba由直线的初始斜率计算。gydF4y2Ba
MALS检测器以多个角度测量散射光强度,如图4A所示。当这些点绘制在ZimM图上时,如图4B所示,可以从可以估计分子量的地方将最佳配合线推回0°。从该线的初始斜率,分子大小,rgydF4y2BaggydF4y2Ba可以准确计算。gydF4y2Ba
MALS探测器的优缺点gydF4y2Ba
以下是MALS探测器的优点:gydF4y2Ba
- 将任意给定角度的结果与相邻角度的结果进行比较的可能性gydF4y2Ba
- 测量从小到大小的所有分子的分子量的可能性gydF4y2Ba
- 精确R的可能性gydF4y2BaggydF4y2Ba测量由于在多个角度的测量gydF4y2Ba
- 分析ZIMM图中的线的形状提供了散射光的角度依赖性的见解。gydF4y2Ba
- 在不严重影响结果的情况下,移除任何失败或包含太多噪声的角度的可能性gydF4y2Ba
以下是MALS系统的局限性:gydF4y2Ba
- 在没有关于分子形状和结构的数据的情况下,选择合适的外推拟合和模型来得到正确的答案是一个挑战。gydF4y2Ba
- 大体积的MALS流细胞需要容纳更多的角度,从而导致峰展宽增加。gydF4y2Ba
- 测量精度较差,因为较低的角度往往是噪声相比的RALS或LALS测量由于细胞的复杂性。gydF4y2Ba
结论gydF4y2Ba
LALS是精确测量R大分子分子量的理想方法gydF4y2BaggydF4y2Ba≥10-15nm半径,因为它降低了散射光的角度依赖性的效果,并消除了外推的要求。gydF4y2Ba
MALS将关键信息提供成散射光的频率的角度依赖性gydF4y2BaggydF4y2Ba>10-15 nm半径,从而允许更准确的RgydF4y2BaggydF4y2Ba测量比RALS / LALS杂交。R.gydF4y2BaggydF4y2Ba可用于表征这些大分子的结构。gydF4y2Ba
该信息的来源、审查和改编来自Malvern Panalytical提供的材料。欧洲杯足球竞彩gydF4y2Ba
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