非对称流场流动分馏(AF4)一种分析技术,用于根据大小分离较大的分子、聚集体和颗粒。欧洲杯猜球平台它是尺寸排除色谱(SEC)的一个有趣的替代方法。

非对称流场流动分馏(AF4)是一种根据大小分离大分子如蛋白质、多糖、聚集体如热诱导蛋白聚集体和颗粒的方法。欧洲杯猜球平台这种分离是通过液体在膜上和通道上流动所引起的流场中流动性的差异获得的。因此,AF4可以用于分离不同粒径的混合物,并获得其物理性质的溶液。

关键特性

AF4的主要特点是:

  • 具有在大范围内分离可溶性和胶体组分的能力,很少或没有特定的相互作用,可以影响样品的洗脱(因为没有使用色谱柱材料)。
  • AF4系统由多角度激光散射(MALLS, Dawn Heleos-II)、差分折射率电池(dRI, Wyatt, Optilab T-rex)和紫外吸收电池(DAD,二极管阵列探测器,Dionex)组成。
  • AF4系统可用于平板和中空纤维圆柱形通道型流池。流动条件和数据采集由Wyatt Eclipse分离系统Dual Tec控制。Eclipse与Dionex ultiMate 3000 UHPLC结合,包含泵,自动进样器,柱室和DAD。
  • AF4结果已经被证明用于单个,单体蛋白(如牛血清白蛋白,66kda),较大的蛋白(Keyhole Limpet Hemocyanin 8.3 MDa),以及二氧化硅颗粒(41-400 nm)的洗脱,说明可以(同时)分析的分子量/颗粒大小的广泛范围。欧洲杯猜球平台

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