EMCCD - iXon SRRF-Stream的超分辨率显微镜功能

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“SRRF-Stream”是一种全新的实时超分辨率显微镜功能，完全适用于AndoriXon Life和iXon Ultra EMCCD相机．

SRRF-Stream超分辨率

实时改进的工作流程，避免后处理。在“实时模式”查看
活细胞动力学-每1-2秒全视场超分辨率图像。> 10 fps使用ROI
低激发强度(mW-W/cm²) -延长活细胞观察和准确的生理学
传统的荧光团，例如GFP -简单的标记，不需要光开关
成本效益-将传统的荧光显微镜转换为超分辨率显微镜

iXon SRRF-Stream比较

线粒体

用宽视野荧光显微镜和SRRF-Stream使iXon Life 888 EMCCD相机记录的荧光标记BPAE细胞的图像比较。使用x63物镜，进一步放大2倍，照明560 nm。对于每一个生成的超分辨率图像，记录100个原始“输入”图像，导致超分辨率图像速率为0.5 Hz。为了在没有SRRF-Stream的情况下进行公正的比较，我们记录了100张标准宽视场图像，然后取平均值。而原始图像是一个更大的细胞场，这里是放大了一个细胞的ROI，以便更容易通过一个小区域显示线强度轮廓比较。分辨能力的提高是很明显的。

有丝分裂

使用Andor Dragonfly共聚焦旋转圆盘荧光显微镜和启用SRRF-Stream的iXon Life 888 EMCCD相机记录了荧光标记的U2OS细胞系*的图像对比。使用x63物镜，外加2倍放大和488 nm照明。在有丝分裂纺锤体的细节水平上，可以注意到分辨力的无与伦比的提高。这一点在通过该区域绘制的相对线强度剖面中得到了证实。

*固定U2OS细胞株，用抗-微管蛋白一抗(绿色，AF488)和phalloidin(红色，罗丹明)染色可见F-actin, DAPI染色可见细胞核。样品由k黎巴嫩ovych A.， Cytoskeleton生物学实验室，AS CR的IMG, v.v.i。

SRRF vs SIM

HCV感染细胞用抗ns5a染色。本文对宽视场(WF)、结构照明显微镜(SIM)和SRRF图像(宽视场图像的SRRF)进行了比较。图像是细胞的同一场，记录在同一显微镜下，使用相同的物镜和光学路径。唯一的区别是，SIM是使用6.5 mm像素的sCMOS探测器记录的，而宽场和合成SRRF是使用16 mm像素的iXon EMCCD探测器记录的。SRRF的分辨率明显提高，表明SRRF比经典衍射极限提高了两倍以上。理论上SIM被限制在经典衍射极限的两倍缩小范围内。样本由伦敦大学学院格罗夫实验室提供。

有丝分裂2

经历有丝分裂的哺乳动物细胞。蓝色表示DNA染色，绿色表示微管，红色表示丝粒。左边的图像显示了宽视场z-堆栈，右边的图像是用SRRF-Stream获得的等效图像。样本由沃里克大学的Phil Auckland提供，图像由伦敦大学学院(UCL)的Henriques实验室提供。

BCS-40膜

用细胞掩膜标记BSC-40活细胞，并在635 nm LED照明下进行200秒延时成像。前100帧对应于1秒曝光的广域成像;第二个100帧对应于SRRF-Stream成像，其中每一帧是由50张图像(20毫秒曝光时间)的SRRF-Stream处理产生的。由David Albrecht(伦敦大学学院Ricardo Henriques和Jason Mercer实验室)制备样品。

网格蛋白坑

mCherry标记的活HeLa细胞网格蛋白包被坑的比较图像，在宽视野显微镜下以2帧/秒的速度记录。对于每个生成的超分辨率图像记录100个原始“输入”图像，导致超分辨率图像速率为2 FPS。通过srrf流图像的一个小区域显示了线强度剖面，代表了距离为150 nm的结构的分辨率。由Caron Jacobs(伦敦大学学院Ricardo Henriques和Mark Marsh实验室)制备样品。