Postnova Analytics的一篇信息丰富的应用文章演示了如何在无需样品预处理的情况下，使用非对称场流分馏（AF4）技术分离大面筋蛋白，并提供准确的分子量和分子大小（Rg）数据。
近年来，由于影响世界5%人口的腹腔疾病的增加以及无麸质饮食的需求，人们对麸质蛋白的兴趣日益广泛。分析面筋蛋白的挑战之一是它们相对较高的摩尔质量和随之而来的大分子尺寸。由于面筋蛋白的分子量高达1000万道尔顿（Da），这使得它们难以通过基于柱的色谱技术（如尺寸排阻色谱法（SEC））进行分离和表征。传统的面筋样品分析要求在色谱分离前进行超声处理，并对产生的碎片进行分析。
应用文章描述了如何使用Postnova AF2000 AF4系统和两个检测器监测洗提液，以分离谷蛋白并对其进行表征。首先，用后新星21角多角度光散射（MALS）探测器测量了谷蛋白及其团聚体和团聚体的Rg；其次是对蛋白质浓度敏感的折射率（RI）检测器，与MALS结合，可以提供分子量测量。
所提供的数据显示了AF4-MALS-RI技术如何分离大的谷蛋白，而无需耗时的样品预处理，从而能够更直接地测量其分子量和回转半径（Rg）分布。此外，对于所分析的两个样品，分子量分布的上端明显高于预期的10MDa。因此，使用色谱柱的技术，如SEC，会过滤掉一些或所有这些大的谷蛋白复合物，导致谷蛋白的整体大小和分子量分布的不正确测定。
有关申请文章的副本，请访问https://info.postnova.com/electrical-asymmetrical-flow-field-flow-fractionation/.